摘要
目的:通过对多房棘球蚴(Em)培养液中的外泌体miRNA进行高通量测序,探究miRNA在多房棘球蚴病(AE)患者血浆外泌体中的表达情况。 方法:收集多房棘球蚴原头节培养液,获取外泌体后对其进行鉴定,然后利用高通量测序检测外泌体miRNA表达谱。对注释到的miRNA进行GO分析。利用miRDeep2鉴定样本中的miRNA(已注释的)表达水平,筛选得到前10miRNA。收集10例AE患者和10例健康志愿者外周血分别作为感染组和对照组,提取两组血浆中的外泌体,使用qPCR方法对上述筛选到的10个高丰度miRNA进行验证,比较两组血浆外泌体中这些miRNA的表达差异。 结果:对Em培养液中的外泌体miRNA进行高通量测序后注释到45个miRNA。GO分析表明,这些miRNA主要与细胞膜的组成部分、有机环状化合物、杂环化合物结合、有机物质代谢过程、初级代谢过程有关。按照丰度从高到低筛选得到10个miRNA,分别为Let-7-5p,miR-1-3p,miR-9-5p,miR-61-3p,miR-71-5p,miR-184-3p,miR-190-5p,miR-277a-3p,miR-745-3p,andmiR-4989-3p,通过qPCR方法对两组血浆外泌体中上述miRNA进行验证,并分析两组之间外泌体miRNA的差异表达。发现感染组中miR-184-3p表达低于对照组。 结论:Em来源的外泌体miRNA与多种生物学功能/通路相关。miR-184-3p是AE患者血浆外泌体的潜在生物标志物,且与对照组相比它在感染组中表达较低。