摘要
目的：探讨PCDH10启动子甲基化对恩杂鲁胺在前列腺癌治疗中敏感性的影响。方法：1.前列腺癌C4-2细胞通过耐药处理构建恩杂鲁胺耐药细胞系2.使用实时定量反转录聚合酶链反应（RT-qPCR）检测处理C4-2细胞及C4-2恩杂鲁胺(Enzalutamide,Enz)耐药细胞（C4-2Enz-R）中PCDH10的表达情况。3.提取C4-2或C4-2Enz-R细胞中的DNA，检测提取基因组DNA的纯度和完整性。4.检测Enz对C4-2或C4-2Enz-R细胞介导的细胞毒性反应并记录450nm处的光吸收（OD）值。5.使用GraphPadPrism8.0计算Enz对细胞的50%抑制浓度率（50%inhibitoryconcentration，IC50）。组间比较采用t检验。 结果：1.体外MTT显示，野生型C4-2细胞系的IC50约为49.97nM，而耐药细胞系的IC50升高至169.5nM，恩杂鲁胺耐药细胞成功构建。2.通过QRT-PCR显示，PCDH10在野生型C4-2细胞的表达量明显高于在C4-2-REnz(Enz-R)细胞中的表达量（t=21.91，Plt;0.01）通过Methylation-specificPCR(MSP)甲基化特异性PCR结果显示，耐药细胞中PCDH10甲基化程度明显。用甲基化抑制剂5-杂氮脱氧胞嘧啶核苷(5-Aza)处理前列腺癌耐药细胞系后，C4-2-REnz细胞中PCDH10细胞中启动子甲基化密度均显著降低，与对照组相比PCDH10mRNA的水平显著升高（t=17.21，plt;0.01），差异具有统计学意义。3.经5-Aza处理过后的C4-2-R-ENZ细胞，对ENZ的敏感性大大增强。而对野生型C4-2细胞系加入5-Aza处理，其对于恩杂鲁胺的敏感性没有改变。结果证实，PCDH10的甲基化促进了C4-2的耐药性。 结论：1.成功构建恩杂鲁胺耐药细胞系。2.PCDH10启动子甲基化导致恩杂鲁胺耐药细胞（Enz-R）PCDH10表达下调。3.PCDH10启动子甲基化影响前列腺癌细胞系C4-2的恩杂鲁胺（Enz）药物敏感性。
NETL