摘要
目的: 研究药食同源类中药黄芪的有效成分黄芪多糖对脾虚水湿不化证模型大鼠物质代谢的干预效果，并探讨黄芪多糖通过肠黏膜通透性纠正脾虚水湿运化失常机体物质代谢紊乱的作用机制，旨在为开发黄芪多糖类保健食品并在脾虚水湿运化失常人群中实施饮食护理提供科学依据。 方法: 使用4周龄Wistar雄性大鼠，随机分为对照组和实验组，实验组采用特制高脂低蛋白饲料和力竭游泳模拟饮食失节和劳倦过度的因素复制脾虚水湿不化证模型，连续8周。模型复制成功后，将实验组随机分为模型组、参苓白术组、黄芪多糖低剂量组、黄芪多糖中剂量组、黄芪多糖高剂量组，给药组分别给予参苓白术溶液、黄芪多糖低、中、高剂量溶液连续灌胃，干预2周。观察并记录大鼠体重、一般状况评分、负重力竭游泳时间、一般代谢水平及脏器指数，并检测各组大鼠血清中胆固醇（CHO）、甘油三酯（TG）、低密度脂蛋白（LDL）、高密度脂蛋白（HDL）、白蛋白（ALB）水平;FITC-Dextran法检测各组大鼠肠黏膜通透性;透射电镜观察各组大鼠十二指肠组织中紧密连接结构变化;WesternBlot检测各组大鼠小肠组织中Claudin-2、Occludin、ZO-1、ERK1/2、p-ERK1/2、MLCK、p-MLC2蛋白表达水平。 结果: 1.脾虚水湿不化证模型大鼠综合一般状况评分显著升高（P＜0.01）,体重明显下降（P＜0.01）;给药干预治疗后，参苓白术组、黄芪多糖低剂量组、中剂量组、高剂量组体重和游泳时间明显增加，且综合一般状况评分显著降低（P＜0.01）。 2.脾虚水湿不化证大鼠一般代谢水平降低，脏器指数、血清中CHO、LDL水平明显增加（P＜0.05,P＜0.01）,TG含量增高不显著，而ALB含量明显降低（P＜0.01）;相比模型组，参苓白术组、黄芪多糖低、中、高剂量组大鼠饮水量、尿量、粪便量增加，脏器指数下降，血清TG含量显著下降（P＜0.05,P＜0.01）,黄芪多糖中、高剂量组CHO、LDL含量降低（P＜0.05,P＜0.01）,黄芪多糖低剂量组CHO、LDL降低不明显，而参苓白术组、黄芪多糖低、中、高剂量组大鼠血清ALB含量显著增加（P＜0.01）,参苓白术组、黄芪多糖低、中剂量组大鼠血清HDL含量显著增加（P＜0.01）。 3.黄芪多糖干预脾虚水湿证大鼠后，参苓白术组、黄芪多糖低、高剂量组大鼠肠道通透性明显降低（P＜0.01）。透射电镜显示黄芪多糖干预后肠上皮细胞间紧密连接呈电子密度较高的带状分布，结构明显改善。 4.与模型组比较，参苓白术组、黄芪多糖各剂量组大鼠肠组织中Claudin-2蛋白表达水平均降低（P＜0.05,P＜0.01）,而ZO-1蛋白表达水平显著增加（P＜0.01）;参苓白术组、黄芪多糖低、中剂量组大鼠肠组织中Occludin蛋白水平增加显著（P＜0.05,P＜0.01）。 5.黄芪多糖干预脾虚水湿不化证大鼠后ERK/MLCK信号通路的关键因子p-ERK1/2、ERK1/2、p-MLC2以及MLCK蛋白表达水平显著下降（P＜0.05,P＜0.01） 结论: 1.模拟饮食和环境因素方法建立的脾虚水湿不化证模型大鼠明显出现脾虚水湿运化失常的相关症状，药食同源类中药黄芪有效成分黄芪多糖能改善脾虚水湿不化证模型大鼠一般状况、游泳时间、体重、一般代谢水平、脏器指数、血生化指标，有效改善脾虚水湿失运机体物质代谢紊乱。 2.黄芪多糖能降低脾虚水湿不化证大鼠肠黏膜通透性，改善肠黏膜紧密连接,利于肠黏膜屏障功能的发挥。 3.黄芪多糖通过调节ERK/MLCK信号通路介导肠道紧密连接蛋白表达，从而改善脾虚水湿不化证肠黏膜通透性和物质代谢紊乱，进一步揭示了黄芪多糖是药食同源类黄芪发挥健脾祛湿作用的物质基础，为黄芪多糖类保健食品开发及其在临床中医饮食护理中的应用、推广提供科学依据。
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