摘要
本试验旨在探究复合饲料添加剂对肉鸡生长性能、血清及肠道相关指标的影响。选取1日龄健康科宝肉鸡1344只，随机分成4组，每组12个重复，每个重复28只鸡。对照组饲喂基础饲粮，试验T1、T2、T3组饲喂复合饲料添加剂添加量分别为0.8、1.0和1.5g/kg的试验饲粮，试验期为42天。本试验共分为四部分： 第一部分：复合饲料添加剂对肉鸡生长性能的影响。在试验第1天、第14天、第28天、第35天、第42天，分别以重复为单位进行空腹称重，并记录采食量。根据肉鸡体重及采食量变化计算平均日增重、平均日采食量以及耗料增重比。结果表明：（1）14和28日龄时，对照组体重均显著低于T2组（P＜0.01）。35和42日龄时，T2组体重显著均高于对照组（P＜0.05）。（2）1~14日龄时，T2组平均日增重显著高于对照组（P＜0.01）。1~42和15~28日龄时，T2组平均日增重均显著高于对照组（P＜0.05）。（3）1~14、15~28及1~42日龄时，各组间平均日采食量无显著差异（P＞0.05）。（4）1~14、15~28和1~42日龄时，对照组料重比与试验组具有差异，并均达到极显著水平（P＜0.01）。36~42日龄时，T2组料重比均显著低于对照组和T1组（P＜0.05）。 第二部分：复合饲料添加剂对肉鸡血清指标的影响。于试验第14天、第28天和第42天，以颈静脉采血的方式采取血液15mL于离心管中，分离血清，置于-20℃储存。其中血清谷丙转氨酶(AlanineTransaminasee，ALT)、谷草转氨酶(AspertateAminotransferase,AST)、碱性磷酸酶(AlkalinePhosphatase，ALP)和乳酸脱氢酶(LactateDehydrogenase，LDH)活性采用GLAMOUR-3000全自动生化分析仪测定，ND抗体效价采用血凝抑制试验方法测定。结果如下：（1）14日龄时，T2组ALT活性显著低于对照组（P＜0.05）。对照组AST活性均显著高于T2组和T3组（P＜0.05）。对照组ALP活性与试验组具有差异，并均达到极显著水平（P＜0.01）。四组LDH活性无显著差异（P＞0.05）。28日龄时，四组AST、ALT、ALP及LDH活性均无显著差异（P＞0.05）。42日龄时，四组ALT和AST活性均无显著差异（P＞0.05），对照组ALP活性与试验组具有差异，并均达到极显著水平（P＜0.01）。对照组LDH活性显著高于T2组（P＜0.05）。（2）14日龄时，T1组ND抗体效价显著高于对照组（P＜0.05）。28日龄时，对照组ND抗体效价与试验组具有差异，并均达到极显著水平（P＜0.01）。 第三部分：复合饲料添加剂对肉鸡肠道相关指标的影响。于试验第14天、第28天、第35天和第42天，分离肉鸡十二指肠、空肠以及回肠组织，用生理盐水冲洗肠道内容物后置于4%多聚甲醛溶液中保存。肠道组织使用苏木精-伊红（HE）进行染色，同时采用实时荧光定量PCR的方法检测空肠黏膜中封闭蛋白1（Claudin-1）、闭合小环蛋白1（ZO-1）和闭合蛋白（Occludin）的表达，用TacoTMRNA试剂盒提取总RNA。结果如下：（1）28和42日龄时，对照组十二指肠隐窝深度显著高于T2组（P＜0.05）。14、28和42日龄时，T2组十二指肠绒毛高度显著高于对照组（P＜0.05）。14、35和42日龄时，对照组空肠隐窝深度显著高于T2组（P＜0.05），对照组空肠绒毛高度/隐窝深度与试验组相比显著降低（P＜0.05）。14、28、35和42日龄时，对照组十二指肠绒毛高度/隐窝深度显著低于T2组（P＜0.05），对照组空肠绒毛高度与试验组相比显著降低（P＜0.05），T2组回肠绒毛高度与对照组相比显著提高（P＜0.05），回肠隐窝深度显著高于T2组（P＜0.05），回肠绒毛高度/隐窝深度显著低于T2组（P＜0.05）。（2）对照组血清D-乳酸含量与二胺氧化酶活性均显著高于T2组、T3组（P＜0.05）。T2、T3组肉鸡空肠Claudin-1mRNA相对表达水平均显著高于对照组（P＜0.05），T2组肉鸡空肠ZO-1mRNA相对表达水平与对照组相比具有显著差异（P＜0.05）。 第四部分：复合饲料添加剂对肉鸡机体炎症反应的影响。在试验第42天时，通过静脉采血、分离并采集脾脏和肠系膜淋巴结（MLNs），均分装于冻存管中。血清中白细胞介素-1β（IL-1β）、白细胞介素-2（IL-2）、白细胞介素-10（IL-10）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）的含量均采用ELISA试剂盒进行测定，并采用实时荧光定量PCR的方法检测脾脏和MLNs中Toll样受体2（TLR2）、Toll样受体4（TLR4）基因的表达。结果如下：对照组血清中IL-1β、TNF-α含量显著高于T3组，IL-2、IL-10含量均显著低于T2组（P＜0.05）。与对照组相比，T2组和T3组肉鸡脾脏中TLR4mRNA相对表达量差异均达到极显著水平（P＜0.01），试验组肉鸡MLNs中TLR4mRNA相对表达量均显著降低（P＜0.05）。
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