摘要
高脂血症(Hyperlipidemia,HLP)作为一种严重危害人类健康的疾病,其在全球的发病率与死亡率逐年升高。在中国,18岁及以上居民,高脂血症的总体患病率高达35.6%。因此,对于高脂血症的治疗就显得尤为重要。桑黄(Sanghuangporussanghuang)是属于刺革菌科(Hymenochaetaceae)桑黄孔菌属(Sanghuangporus)的一种珍贵的药食同源大型真菌,其能够减少脂质沉积造成的血脂升高,起到降血脂作用。因此研究桑黄的降脂作用,具有重要的研究价值与意义。 本论文研究的目的是以降脂活性为指标,来探究桑黄不同提取物的降脂作用。研究方法为首先对桑黄干燥子实体进行乙醇回流提取,得到桑黄乙醇提取物。然后分别用乙酸乙酯与正丁醇对桑黄乙醇提取物进行萃取,得到桑黄乙酸乙酯萃取物与正丁醇萃取物。通过油酸诱导HepG2细胞构建体外高脂细胞模型,以降脂活性为指标,通过油红染色实验、TG、TC含量测定的生物学手段与SEM观察细胞形貌变化,AFM检测细胞力学特性变化的物理学方法相结合来探究桑黄降脂作用的活性成分。实验结果表明,桑黄乙酸乙酯萃取物比正丁醇萃取物的降脂效果更佳。在以降脂活性为指标的前提下,对乙酸乙酯萃取物进行成分分离,分离得到五个组分(H1-H5)。再通过LC-MS对H1-H5中的主要成分进行分析,共分析出六种成分,其中香豆素类一种,H1-1:7-甲氧基香豆素;苯甲酸类一种,H5-2:O-Toluicacid;多酚类两种,H2-1:Caffeicacid、H5-1:Protocatechuicacid;黄酮类两种,H3-1:5-hydroxy-7-methoxy-flavone、H4-1:Naringenin。从体外降脂实验结果中发现,油酸诱导HepG2细胞建立高脂细胞模型后,细胞中的脂质沉积、TG、TC含量等都出现明显升高,在细胞形貌与力学特性检测中发现,高脂细胞中的细胞呈凸起状态,其高度、粘附力、杨氏模量明显增加。组分H1-H5作用后,能够减少高脂细胞中的脂质沉积情况与TG、TC的含量,修正细胞的凸起形貌与改善高脂细胞的力学特性。其中组分H4(Naringenin)的降脂效果更加明显。 综上所述,在以降脂活性为指标的前提下,对桑黄中起降脂作用的活性成分进行分离与分析,结果表明,桑黄乙酸乙酯萃取物中Naringenin的体外降脂作用更加明显。本实验从降脂作用出发,探究了桑黄萃取物的降脂作用,这丰富了桑黄活性成分的研究内容,为桑黄的降脂活性研究与应用提高了参考,对于高脂血症的治疗提供了一定的实验数据。