摘要
目的：确定藿乌粉的提取与纯化工艺，建立藿乌粉的质量标准，为申报新兽药提供依据。 方法：以二苯乙烯苷、淫羊藿苷、朝藿定A 、朝藿定B 含量以及干膏得率为评价指标，乙醇浓度、固液比、提取时间、提取次数为影响因素，在单因素试验考察的基础上，采用L9 (34) 正交试验法，确定藿乌粉的最佳提取工艺；以浓缩后的藿乌粉提取液为原料，以二苯乙烯苷以及淫羊藿三种黄酮成分的吸附率和洗脱率为指标，通过单因素试验考察AB-8型大孔树脂对四种指标成分吸附的影响因素（上样浓度、上样体积和上样流速）、洗脱的影响因素（洗脱乙醇浓度、洗脱剂用量），确定最佳纯化工艺；通过对藿乌粉性状、制何首乌薄层色谱鉴别、淫羊藿薄层色谱鉴别、水分、外观均匀度、装量、二苯乙烯苷和淫羊藿三种黄酮成分含量的考察，建立藿乌粉的质量标准。 结果：1、藿乌粉的最佳提取工艺为：加入12倍于药材的6 0%乙醇溶液提取2次，每次1.5h; 3次重复验证试验指标成分二苯乙烯苷、淫羊藿苷、朝藿定A 、朝藿定B 的平均质量分数分别为19.38、6.98、11.11、36.46 m g ?g-1，平均干膏得率为16.74% 。 2、藿乌粉的最佳纯化工艺条件为：取生药质量浓度为0.6g生药.mL-1的藿乌粉提取液2.5BV，以4BV ?h-1的流速上样，用 6BV 蒸馏水洗去水溶性杂质，再用4BV 60%乙醇，以 2 B V ?h-1的流速洗脱；在此条件下进行验证试验，二苯乙烯苷的纯度由纯化前的5.12%变为了纯化后的25.61%，三种黄酮之和的纯度由纯化前的2.78% 变为了纯化后的9.02% 。 3、二苯乙烯苷方法学考察结果表明二苯乙烯苷进样浓度与色谱峰峰面积在12.25? 392.00昭 ?m L-1 (R2=0.9999)范围内线性关系良好，其平均加样回收率为102.05%，R S D (n=6) 值为 1.80% 。 4、同时测定淫羊藿苷、朝藿定A 、朝藿定B 的HPLC方法学考察结果显示淫羊藿苷、朝藿定A 、朝藿定B 进样浓度与色谱峰峰面积分别在5.42?346.92、3.49?223.44、4.07?260.68咫 ?m L-1 (R2均为0.9999)范围内线性关系良好，淫羊藿苷、朝藿定A 、朝藿定B 三种成分的平均加样回收率依次为99.40%、101.04%、99.14%，R S D (n=6)值依次为 0.43%、0.41%、0.40% 。 5、确定了蕾乌粉中制何首乌和淫羊蕾两味约材的薄层鉴别方法；建2 了蕾乌粉中二苯乙烯苷和淫羊藿三种黄酮成分的HPLC测定方法，测得三批藿乌粉样品中二苯乙烯苷的平均含量为18.20 m g ?g-1，淫羊藿三种黄酮的平均含量为19.40 m g ?g-1，结合实际生产中的损耗，将藿乌粉中二苯乙烯苷的含量标准定为不低于1.20% ，淫羊藿三种黄酮的含量标准定为不低于1.30% 。 结论：本研究优选出的工艺稳定可行，重复性好，可用于藿乌粉的制备；建立起的质量标准操作简单、专属性强，可以准确。
NETL