摘要
研究背景及目的：急性肾损伤（Acute kidney injury，AKI）在全球范围内发病率一直居高不下，造成了巨大的社会经济负担。尽管进行了大量相关研究，AKI的防治手段依旧十分有限，风险评估、预防、对症治疗仍然是临床医生可以采取的主要手段。研究表明，Nrf2/HO-1信号通路的激活可通过抗炎、抗氧化应激、抗细胞凋亡等机制延缓AKI进展。苯磺酸瑞马唑仑（Remimazolam，Re）是一种新型的苯二氮?类药物，因具有起效快、对肝肾功能和血流动力学影响较小的优点而受到广泛关注，有研究表明Re还具有一定的器官保护作用。目前，Re关于AKI的研究较少，其对于AKI发生发展的影响也尚不明确，所以本研究拟通过体外细胞实验，探索 Re 对脂多糖（Lipopolysaccharide，LPS）刺激引起的人肾皮质近曲小管上皮细胞（Human Kidney-2，HK-2）损伤的影响及作用机制，揭示Re在AKI进程中可能发挥的作用。 方法：1.利用CCK-8法检测细胞活力，分别验证Re和LPS对于HK-2细胞活力的影响，确定后续实验的相关药物浓度。2.通过ELISA法检测各实验组细胞的炎症因子（IL-1β、IL-6、TNF-α）释放水平，验证Re对于LPS诱导的炎症反应的影响。3.使用流式细胞技术检测细胞凋亡，验证Re对于LPS诱导HK-2细胞凋亡的影响。4.Western bolt法检测各实验组细胞Nrf2/HO-1信号通路相关蛋白的表达情况。 结果：1.不同浓度LPS（0.1μg/mL、0.5μg/mL、1μg/mL、5μg/mL、10μg/mL、20μg/mL）处理HK-2细胞24小时后，细胞活力分别为（75.15±5.27）%、（69.37±4.02）%、（60.66±1.77）%、（57.61 ±3.15）%、（47.24±2.28）%、（31.91±4.71）%，而Re的浓度在5μg/mL-200μg/mL范围内时对HK-2细胞活力无明显影响。2.Re可减轻LPS导致的HK-2细胞活力降低，效果呈浓度依赖性。3.ELISA检测显示Re减少了LPS诱导后的HK-2细胞炎症因子释放。4.流式细胞凋亡检测结果：Re可减少LPS诱导的HK-2细胞凋亡。5.LPS诱导后HK-2细胞Nrf2/HO-1通路相关蛋白表达增多，而Re处理组相关蛋白表达增多更为明显。 结论：Re可能通过上调Nrf2/HO-1信号通路，减轻脂多糖诱导的HK-2细胞凋亡及炎症因子释放。
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