摘要
高尿酸血症主要是人体内尿酸的产生与排泄不平衡导致的一种代谢类疾病。目前临床用药面临着药物种类少，药物毒副作用大等问题，因此开发低毒、高效的药物越来越受到关注。而黄嘌呤氧化酶是控制尿酸生成的关键酶，也是治疗高尿酸血症的重要研究靶点。因此本文基于黄嘌呤氧化酶抑制作用开展了相关研究。 我国作为食物大国，食物种类众多，其中许多食物既是食物又是药物，因此从药食两用资源出发，发现其活性成分开发新型药物，具有安全性高的特点。本文首先对国家健康卫生委员会发布的药食同源资源中的54种资源开展了黄嘌呤氧化酶抑制活性的筛选，利用高效液相色谱 (HPLC) 检测酶促反应中尿酸的生成量，以此评价药食同源资源的黄嘌呤氧化酶抑制活性。研究发现胖大海 (Sterculiae Lychnophorae)、花椒(Zanthoxyli Pericarpium)、草果 (Tsaoko Fructus) 等提取物具有较强的黄嘌呤氧化酶抑制活性。由于胖大海在抗高尿酸血症方面研究较少，对其深入研究有助于了解其活性物质作用基础，因此本文选择胖大海进行了深入研究。 胖大海 (别名：大海子)，属于梧桐科苹果属植物胖大海成熟干燥的种子，作为中国一种传统药食两用资源，自古便被用于治疗肺热声哑，咽喉疼痛，燥热便秘，头痛目赤等疾病患，在临床上也常用于治疗急性扁桃体炎。本研究以黄嘌呤氧化酶抑制作用为导向，发现胖大海提取物的乙酸乙酯萃取部分 (EF) 对黄嘌呤氧化酶具有显著的抑制效果，浓度为100 mg·mL-1时抑制率高达94.94%。因此我们对胖大海提取物的乙酸乙酯萃取部分开展了化学成分的研究。利用多种分离手段和纯化方法从胖大海乙酸乙酯萃取部中分离得到了17个单体化合物，通过现代波谱学技术，结合参考文献，鉴定了全部化合物的结构，分别是：ethyl 2, 3-dihydro-1, 4-benzodioxin-6-carboxylate (1), 3-(butyryloxy)-4-hydroxybenzoate 4-(2-Formyl-5-(methoxymethyl)-1H-pyrrol-1-yl) butanoic acid (4), β-sitosterol (5), vanillic acid (6), scopoletin (7), E-cinnamic acid (8), ethyl 3, 4-dihydroxybenzoate (9), uridine (10), catechin (11), oleamide (12), dihydrophaseic acid (13), 3, 4-dihydroxybenzoic acid (14), methyl (9S, 10R, 11E, 13R)-9, 10, 13-trihydroxyoctadec-11-enoate (15), (9S, 10R, 13R, E)-9, 10, 13-trihydroxyoctadec-11-enoic acid (16)和caffeic acid (17)，其中化合物1和2为新化合物，化合物4、7、11、12、15及16为首次从胖大海中发现。对分离鉴定的化合物的体外抑制黄嘌呤氧化酶活性筛选研究表明：化合物4具有最强的黄嘌呤氧化酶抑制作用，IC50值为114.41 μM。 此外，由于高尿酸通常会引发炎症反应，本文最后亦对胖大海提取物的乙酸乙酯萃取部分进行了抗炎作用及其机制研究。通过尿酸刺激HK-2细胞构建高尿酸血症细胞炎症模型，给药处理后首先利用正置显微镜观察了细胞形态变化，再通过ELISA试剂盒检测了细胞中IL-6、IL-1β和TNF-α三种炎性因子的表达水平，最后用Western blot实验检测了SL-EF对PI3K/AKT/NF-κB信号通路的相关蛋白表达的影响。结果分析显示胖大海乙酸乙酯萃取部的EF对处于高尿酸环境的人肾皮质近曲小管上皮细胞具有一定的保护作用，通过抑制PI3K、AKT、NF-κB和IκBα蛋白的磷酸化，降低炎性因子的产生水平，从而达到抑制炎症的作用。 本研究从药食同源资源出发，旨在发现一些具有抗高尿酸血症功能的天然活性资源，为人类疾病的预防和治疗提供科学依据。研究发现的胖大海在高尿酸血症上的作用，也为该资源在药物与功能食品上的深入开发利用提供了理论依据。
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