摘要
黄河三角州地区是非常典型的盐渍土,该地区可以作为我国后备耕地资源。然而，该区土壤结构差、易板结。本研究通过基因测序技术，平板稀释法等明确了该地区微生物群落的种类，鉴定和筛选了关键的耐盐真菌，并通过高通量测序，鉴定了耐盐真菌的系统进化树。以上研究为该地区土壤菌落人工改良，挖掘抗盐活性菌落提供重要的参考。为此开展了以下几方面的研究内容：(1)解析不同盐浓度环境下微生物群落的变化;(2)寻找不同盐浓度下微生物生物量与微生物群落变化的关联;(3)筛选关键的耐盐真菌;(4) 根据高通量测序，对进行鉴定过的耐盐真菌进行系统进化树的构建，分析各种间的亲缘关系。主要研究结果如下: 1. 本研究在高盐环境下共采集土壤样品336份，其中采样地点包括广饶县159份、东营区157份、垦利区20份。经分离鉴定，共分离获得高盐真菌397株，结合形态学和分子生物学的方法将菌株鉴定到81个属140个种，其中镰刀菌属(Fusarium spp.)、链孢属(Alternaria spp.)、间座壳属(Diaporthe spp.)在山东省东营市高盐环境中分布数量最广。 2. 对广饶县、东营区和垦利区三地中可培养高盐真菌群落结构和物种组成进行研究发现，东营区可培养高盐真菌物种数量最高，数量为68个，其次为垦利区，数量为38个，广饶县物种数量最低，数量为19个。 3. 对高盐真菌在各个真菌物种分类等级上的数目。利用高通量测序技术分析耐盐植被群落下土壤真菌种类，共获得3门9纲23目50科81属。在门的分类水平上主要包括:子囊菌门(Ascomycota)、毛霉门(Mucoromycota)、担子菌门(Basidiomycota)；在纲的分类水平上主要包括：粪壳菌纲(Sordariomycetes)、毛霉纲(Mucoromycetes)、散囊菌纲(Eurotiomycetes)、座囊菌纲(Dothideomycetes)等；在目的分类水平上主要包括：散囊菌目(Eurotiales)、毛霉菌目(Mucorales)、肉座菌目(Hypocreales)、格孢菌目(Pleosporales)、丛梗孢目(Moniliales)等；在科的分类水平上主要包括：曲霉科(Aspergillaceae)、丛赤壳科(Nectriaceae) 、 线 虫 草 科 (Ophiocordycipitaceae) 、 肉 座 菌 科(Hypocreaceae)、笄霉科(Choanephoraceae)、格孢菌科(Pleosporineae)、枝孢霉科(Cladosporiaceae)等；在属的分类水平上主要包括：支顶孢属(Acremonium)、曲霉属(Aspergillus)、枝孢属(Cladosporium)、镰刀菌(Fusarium)、小球壳孢属(microsphaeropsis)、毛霉属(Mucor)、青霉属(Penicillium)、茎点霉属 (Phoma)、紫霉属(Purpureocillium)、根霉属(Rhizopus)等。 4. 对广饶、东营、垦利地区高盐环境样品进行高通量测序分析，共检测出真菌3门9纲23目50科81属140种，子囊菌门(Ascomycota)为优势菌门，粪壳菌纲(Sordariomycetes)为最优菌纲，格孢腔菌目(Pleosporales)是总的优势菌目，孢腔菌科(Pleosporineae)是高盐真菌的优势菌科，属水平中最优势菌属为镰刀菌属(Fusarium)。 5. 在本研究分类学基础上，对所分离鉴定的397株耐盐真菌进行了rDNA-ITS序列系统发育学研究，构建系统进化树，分析各种属间的亲缘关系。经过系统发育分析，发现与其形态学鉴定结果一致。 本研究初步明确了山东省高盐环境中高盐真菌物种组成及分布特点，研究过程中获得的真菌菌种作为宝贵微生物资源，可为后续高盐基因发掘、活性代谢产物开发等研究提供有价值的候选菌株。
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