摘要
据历年的癌症统计数据估计，癌症病人的数目一直处在增长的状态。癌症的治疗也从之前比较传统的手术切除、放射疗法以及化学药物疗法转变为更多更全面的治疗方案，如近些年来发展如火如荼的免疫检查点疗法，这些新的疗法在临床治疗中相对化疗药物对人体正常细胞造成的损害更小，解决了部分恶性肿瘤对于传统疗法耐受问题。自 2018 年两位科学家发现的免疫检查点 CTLA4 和PD-1/PD-L1 获诺贝尔生理学奖的后，免疫检查点疗法逐渐成为肿瘤治疗的一把利刃，其中 PD-1/PD-L1 抗体药物在治疗各种肿瘤中的显著效果促使 FDA 批准了很多针对PD-1/PD-L1 通路的阻断药物，然而对 PD-1/PD-L1 的治疗效果影响因素分析发现PD-L1表达比较低的肿瘤病人治愈效果有限，对PD-L1高表达病人治疗相对显著，同时多种肿瘤临床数据也表明PD-1/PD-L1阻断剂的治疗与肿瘤病人自身的PD-L1状态相关，因此在临床方案中，病人PD-L1表达情况也被作为 PD-1/PD-L1 阻断剂治疗的生物标志物之一。综上，我们提出猜想：PD-L1低表达病人是否可以通过提高自身肿瘤细胞 PD-L1 表达以获得更好的治疗效果？ 根据文献报道，DNA损伤能够提高肿瘤细胞PD-L1表达，同时DNA损伤的积累也可以造成肿瘤细胞的损伤死亡。我们依据本实验室对于DNA损伤修复基因的研究以及其在肿瘤发生发展和治疗过程中的重要作用，猜测DNA损伤修复基因的抑制有可能会影响到肿瘤细胞 PD-L1 表达，进而利用实验室特有的FEN1抑制剂SC13通过抑制DNA损伤修复提高PD-1/PD-L1治疗效果。 我们首先通过细胞实验验证 PD-1 阻断剂对于不同的肿瘤细胞系杀伤效果，验证了肿瘤细胞PD-L1的表达与PD-1阻断剂对于肿瘤细胞杀伤效果的关联性。然后我们利用FEN1抑制剂SC13对PD-L1表达低的肿瘤细胞进行处理，通过对细胞PD-L1的mRNA和蛋白水平以及表面情况的分析，发现SC13可以提高肿瘤细胞PD-L1表达。我们随后进一步对细胞杀伤效果进行评定，发现SC13可以提高PD-1阻断剂对肿瘤细胞的杀伤效果。随后我们通过对荷瘤小鼠的处理和分析也证明了SC13联合PD-1阻断剂治疗的可行性。最后我们通过对于细胞水平的dsDNA以及cGAS-STING-NF-κB通路蛋白的检测发现SC13可能是通过激活cGAS-STING-NF-κB通路而提高细胞PD-L1表达。 综上所述，本研究明确了FEN1对PD-L1表达的影响，以及SC13与PD-1阻断剂联合治疗肿瘤的可行性，同时探索了 FEN1 影响细胞 PD-L1 表达的可能机制。
NETL