秦巴山区天麻共生蜜环菌遗传多样性研究及优良菌种的选育

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中文摘要：蜜环菌（Armillaria mellea）具有很高经济价值，是名贵中药材猪苓和天麻的共生菌，天麻和猪苓的生长必须依靠蜜环菌为其提供营养。秦巴山区有着独特的地理环境和气候，成为中国最大的天麻主产区之一，蜜环菌的逐年使用，加上当地种植户的管理不当，使得菌种发生严重退化现象，寻找和获得优势蜜环菌成为影响天麻产量高低的一大因素。作者从秦巴山区天麻主要生产区采集蜜环菌，经分离、筛选、纯化、复壮后，结合菌丝、菌索形态，通过形态学特征，遗传学特征，天麻与蜜环菌的有性繁殖及无性繁殖等方面对天麻蜜环菌进行优良菌株的选育，以期为秦巴山区的天麻产业向科技化、工业化奠定基础。本试验的主要研究成果如下： 1. 通过在秦巴山区收集蜜环菌，经分离获得18株蜜环菌，采用Potato Dextrose Agar （PDA ）固体培养基对18株蜜环菌菌丝、菌索形态，生长速率，菌索颜色，粗细，分支密集程度以及发光强度等特征进行研究发现：生长特性表现最优的是ZY-3、ZY-5、ZY-9，其次是ZY-15、ZY-17，其他菌株生长特性均无明显表现。 2. 通过提取18株蜜环菌的DNA，进行rRNA-ITS序列扩增，对序列进行两两相似性比较，发现ZY-15与其他菌种的差异性显著。通过构建系统进化树对18株蜜环菌进行物种鉴定及亲缘关系分类。将其划分分为4个种：Armillaria sinapina、Armillaria gallica、Armillaria mellea、Armillaria cepistipes。制备粗酶液，进行酯酶同工酶研究。通过菌株间相似系数比较，18株蜜环菌具有丰富的生物多样性。 3. 18株蜜环菌与天麻进行伴栽试验中，乌、红天麻的产量有明显区别。天麻无性繁殖阶段，ZY-17与红、乌天麻组合的天麻产量最高，分别为2.931 kg/m2和1.523 kg/m2，其次为ZY-9天麻有性繁殖阶段ZY-9与红天麻组合的天麻产量最高、ZY-17与乌天麻组合的天麻产量最高，分别为1.277 kg/m2和1.004 kg/m2。 4. 选取优势菌株ZY-9、ZY-17，采用单因素试验和正交试验，以生物量作为测量指标对2株蜜环菌的培养条件进行优化。获得最佳碳源为葡萄糖，最佳氮源为蛋白胨，最佳无机盐为Na2HPO4。

作者：

杨海旭

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关键词：

天麻共生蜜环菌遗传多样性优良菌种有性繁殖无性繁殖

授予学位：

硕士

学科专业：

微生物学

导师：

邓百万

学位年度：

2016

学位授予单位：

陕西理工大学

语种：

中文

中图分类号：

Q94