摘要
硒代蛋氨酸（SeMet）是养殖动物主要的硒源之一，有抗炎和抗氧化等多种保护效果。但SeMet在蛋鸡饲养过程中对肝脏损伤的防治作用尚不明确。已知脂多糖（LPS）入血可引起机体炎症的发生。为了探讨SeMet对鸡肝组织可能的保护作用，我们在复制LPS诱导鸡肝脏损伤模型的基础上，通过膳食添加SeMet构建SeMet与LPS互作模型。同时使用鸡肝细胞系（LMH）构建体外验证模型。通过透射电子显微镜、Hamp;E染色、天狼星红染色和Masson染色观察组织病理损伤情况，通过氧化应激试剂盒与ROS荧光标记检测氧化应激水平，使用免疫荧光法检测肝细胞焦亡情况，最后采用qRT-PCR和Western-Blot等方法对炎症、细胞焦亡、纤维化以及热休克蛋白相关基因等的表达进行了检测。 研究结果如下： （1）NC组和SeMet组肝脏外观和Hamp;E染色观察正常，LPS组可见较多点状出血和坏死病灶，肝细胞变性坏死，炎性细胞浸润，胶原纤维沉积，肝功相关指标T-BIL、ALP、CHOL、AST和ALT显著升高，LPS+SeMet组上述指标的变化和损伤均得到显著改善（P＜0.05）。与NC组相比，LPS组炎症相关因子TNF-α、IL-6和IL-1β的mRNA表达显著上调，IL-2显著下调（P＜0.05），纤维化相关基因α-SMA，TGF-β和Vimentin的mRNA表达和蛋白表达显著增高，E-cadherin的表达显著降低（P＜0.05），SeMet可显著缓解LPS诱导的上述指标异常表达（P＜0.05）。体外细胞试验结果与体内结果基本一致。上述结果证实SeMet具有缓解LPS诱导肝组织炎症和纤维化的作用。 （2）氧化应激相关指标（CAT、SOD、GSH、MDA和ROS）检测结果表明，与NC组相比，SeMet组抗氧化能力显著增加，LPS组氧化应激水平显著增加且伴随ROS积累，LPS+SeMet组上述变化水平可得到显著缓解（P＜0.05）。热休克蛋白相关基因（HSP60、HSP70和HSP90）的mRNA和蛋白表达检测结果表明，LPS可诱导上述基因表达增加，SeMet与之互作后可得到明显抑制（P＜0.05）。细胞试验同样证实了以上变化趋势。上述结果证实SeMet具有缓解LPS诱导肝组织氧化应激和热休克蛋白过表达的作用。 （3）焦亡相关基因（NLRP3、GSDMD-N’、GSDMA、GSDME、ASC、Caspase1、IL-1β和pro-IL-1β）的mRNA及蛋白表达水平检测结果表明，NC组与SeMet组以上转录和蛋白的表达水平无统计学差异（P＞0.05），而在LPS组显著升高，免疫荧光法检测发现LPS组NLRP3与GSDMD表达增强，而SeMet与LPS互作后上述表达变化可得到显著缓解（P＜0.05）。上述结果证实SeMet具有缓解LPS诱导肝组织细胞焦亡的作用。 综上所述，膳食SeMet能有效缓解LPS诱导的蛋鸡肝脏热休克蛋白表达增高以及氧化应激的发生，并可通过抑制肝组织的炎症、纤维化和细胞焦亡过程改善LPS引发的鸡肝脏损伤。本研究结果可为禽类养殖与饲料开发过程提供营养学参考，并为家禽疾病治疗提供新思路。
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