摘要
猪圆环病毒2型(Porcinecircovirustype2,PCV2)感染可引起包括断奶仔猪多系统衰竭综合征在内的的各类疾病,感染PCV2的猪只免疫功能下降,因而易继发其他病原感染,给养猪业造成严重经济损失。猪肺炎支原体感染可引起猪支原体肺炎,损伤猪只呼吸道免疫系统,进一步导致多种病原混合感染。在临床上常见PCV2与猪肺炎支原体混合感染,对猪只健康及经济效益造成重大影响,疫苗免疫是PCV2与猪肺炎支原体防控的重要手段。前期研究已成功研制出猪圆环病毒2型、猪肺炎支原体二联灭活疫苗,为筛选更加优秀的疫苗佐剂,本研究对多种佐剂组分进行了效果评价。 在前期研究基础上,选择了4种复合佐剂参与制备的猪圆支二联苗251C、SP、FM及MF,在BALB/c小鼠上评估了免疫保护作用。以皮下注射免疫途径接种6-8周龄BALB/c小鼠,间隔14d后加强免疫,28d经腹腔注射途径接种0.5mL滴度为1×106.0TCID50/mL的PCV2DBN-SX07毒株。通过小鼠的血清PCV2抗体水平、猪肺炎支原体抗体水平及PCV2病毒血症,分析疫苗的免疫保护作用。试验结果表明,猪圆支二联苗SP、FM及MF可显著提高血清PCV2抗体水平,猪圆支二联苗SP及FM可显著抑制小鼠的病毒血症,猪圆支二联苗251C、SP、FM及MF可显著提高血清猪肺炎支原体抗体水平。 选取提高抗体水平、抑制病毒血症效果最显著的猪圆支二联苗FM与SP进行免疫增强作用的研究。分别从体液免疫、细胞免疫及抗原提呈能力等三个角度对猪圆支二联苗FM与SP进行评价。以皮下注射免疫途径接种6-8周龄BALB/c小鼠,2d后取小鼠淋巴结,分析淋巴结树突细胞表面抗原提呈相关分子CD40、CD86及MHCⅡ表达水平;间隔14d后加强免疫,28d后取小鼠脾脏检测脾脏指数、脾脏淋巴细胞比例、IFN-γ分泌水平及淋巴细胞增殖活性。试验结果表明,猪圆支二联苗FM显著提高脾脏B淋巴细胞比例至61.6%;猪圆支二联苗SP可非常显著增强脾细胞增殖反应,刺激指数为3.09;猪圆支二联苗FM及SP可诱导树突细胞成熟,提高免疫后2d淋巴结中树突细胞表面分子CD86或MHCⅡ表达水平。 本研究以BALB/c小鼠为实验动物,评价了含不同佐剂的猪圆支二联苗免疫效果,发现复合佐剂SP及FM可提高小鼠体液免疫水平,促进树突细胞成熟,提升疫苗的免疫保护作用,为后续猪圆支二联苗佐剂的开发提供了参考。