摘要
目的: 通过手术切除大鼠双侧卵巢的方式构建模拟绝经后骨质疏松症(PMOP)模型，观察骨碎补干预下PMOP大鼠骨组织中Wnt/β-catenin相关蛋白的表达水平与粪便中肠道菌群结构和多样性变化二者之间的关系。 方法: 将18只SPF级雌性SD大鼠随机分为模型组（OVX组）、假手术组(SHAM组)、骨碎补组（OVXDF组），每组6只。适应性喂养1周后，以手术方式对OVX组和OVXDF组进行PMOP模型构建，SHAM组切除卵巢周围等量脂肪。OVXDF组在完成造模后每日给予骨碎补煎液灌胃1次，余两组灌胃等量生理盐水，根据大鼠体质量每2周调整给药量。12周后，全麻下收集腹主动脉血，离心后ELISA法检测血清标本中PINP和NTX-Ⅰ含量;分离大鼠双侧股骨，右侧股骨行Micro-CT断层扫描获取Tb.N、Tb.Th和Tb.Sp等参数数据并分析;Western-Blot检测左侧股骨组织中Wnt3a、β-catenin及RUNX2相关蛋白的表达;16S rRNA扩增子测序技术检测分析大鼠肠道菌群群落结构和多样性。 结果: 1.各组血清PINP、NTX-Ⅰ含量 与SHAM组相比，OVX组PINP、NTX-Ⅰ均存在统计学差异(P＜0.01);与OVX组相比，OVXDF组PINP存在统计学差异(P＜0.05)、NTX-Ⅰ存在统计学差异(P＜0.01)。 2.各组骨小梁结构变化 SHAM和OVX组，OVX和OVXDF组两对比较中Tb.N、Tb.Th、Tb.Sp变化均存在统计学差异(P＜0.01)。 3.各组骨组织蛋白表达情况 SHAM和OVX组，OVX和OVXDF组两对比较中Wnt3a、β-catenin、RUNX2均存在统计学差异(P＜0.01)。 4.各组菌群多样性指数分析 与SHAM组相比，OVX组Chao1、Faith-pd和Shannon指数变化均具有统计学差异(P＜0.05、P＜0.05、P＜0.01);与OVX组相比，OVXDF组Chao1、Faith-pd和Shannon指数变化均具有统计学差异(P＜0.05、P＜0.05、P＜0.01)。 5.各组菌群门水平组成结构分析 SHAM和OVX组，OVX和OVXDF组两对比较中厚壁菌门和疣微菌门变化均具有统计学差异(P＜0.01)，拟杆菌门变化均无统计学差异（P＞0.05）。 6.各组菌群属水平组成结构分析 SHAM和OVX组，OVX和OVXDF组两对比较中苏黎世杆菌属、嗜黏蛋白阿克曼菌属变化均具有统计学差异(P＜0.01);乳杆菌属在SHAM和OVX组变化无统计学意义(P＞0.05)，在OVX和OVXDF组变化有统计学意义(P＜0.05)。 结论: 骨碎补可以促进PMOP模型大鼠的成骨功能同时抑制破骨功能，在一定程度上改善PMOP模型大鼠的骨质量，缓解骨微结构破坏，同时增加Wnt3a、β-catenin及RUNX2蛋白的表达以减少骨量丢失。此外，还可以增加PMOP模型大鼠肠道菌群丰度及多样性，调节有益菌群的比例及数量，发挥改善骨健康的作用。基于上述结果推测骨碎补或是借助改善肠道菌群构成介导Wnt/β-catenin信号通路来减少PMOP模型大鼠的骨量丢失。
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