摘要
目的: 通过本次试验，观察丹蛭降糖胶囊(DJC)对糖尿病(DM)大血管病变且符合中医气阴两虚夹瘀证的患者临床治疗效果及对糖尿病模型大鼠颈动脉AMPK/mTOR通路相关蛋白影响，探讨DJC对DM大血管病变的临床疗效及相关通路作用机制，为今后临床上更好地应用提供依据。 方法: 1.临床观察:选取同时满足气阴两虚夹瘀证及DM大血管病变诊断标准的受试者50例，将其随机分对照和观察组，每组各25例，两组均予以一般基础降糖治疗，对照组除基础治疗外，加用阿托伐他汀钙片，服用方法为每晚10mg，观察组则在对照组的基础上加用DJC，服用方法为每天3次，每次5粒（0.4g/粒）。治疗前记录患者一般情况，评估患者中医证候，检测患者血糖、血脂、颈动脉内膜厚度(IMT)、斑块数量及大小等指标，干预12周后再次复查血糖、血脂、颈动脉超声等相关检查，将治疗前后数据进行统计对比分析，以评估DJC对DM大血管病变的临床疗效。 2.动物实验:随机从80只SD大鼠中抽取10只作为空白组（NC组）进行普通喂养，剩余的大鼠予以高糖高脂饲料喂养及1％链脲佐菌素腹腔注射相结合的方法诱导DM大血管病变模型，造模后再随机分为糖尿病模型组（MC组）、二甲双胍组（Met组）、丹蛭降糖胶囊低中高剂量组（DJC-L、DJC-M、DJC-H组），干预前分别测量各组体重及血糖。根据体表面积等量换算给予相应剂量灌胃，干预8周后，复测体重及血糖，进行麻醉、采血、取材，检测大鼠血糖、血脂情况，利用染色方法进行颈动脉病理形态观察，采用Western Blot法检测AMPK/mTOR通路及相关衰老蛋白表达。 结果: 1.临床试验: (1)中医证候积分:治疗后两组中医证候积分均较干预前显著降低(P＜0.05)，观察组中医证候疗效总有效率91.30％，对照组66.67％，观察组中医证候疗效优于对照组(P＜0.05); (2)血糖相关指标:与治疗前相比，两组的血糖均有所改善(P＜0.05)，且观察组的空腹(FPG)及餐后血糖(2hPG)下降程度更为明显(P＜0.05)，治疗后的两组糖化血红蛋白(HbA1c)指标无明显差异(P＞0.05); (3)血脂相关指标:两组的4项血脂水平较干预前改善(P＜0.05)，且治疗后的甘油三酯(TG)及低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)水平改善效果观察组要优于对照组(P＜0.05); (4)颈动脉超声:与治疗前相比，两组的颈动脉内膜厚度值(IMT)均减少(P＜0.05)，且观察组改善情况优于对照组(P＜0.05);与治疗前相比，观察组的斑块数量减少(P＜0.05)，但两组间无明显差异(P＞0.05);与治疗前相比，两组的最大斑块面积未见明显改善(P＞0.05)，但观察组较对照组面积缩小(P＜0.05)。 2.动物实验: (1)体重:药物干预8周后，与NC组相比，MC组及各干预药物的4组的大鼠体重均下降(P＜0.05)，与MC组相比，DJC-M、DJC-H、Met组下降明显(P＜0.05); (2)空腹血糖:与NC组相比，其余各组空腹血糖均升高(P＜0.01);药物干预的4组中与MC组相比，除DJC-L组，其余3组空腹血糖水平均降低(P＜0.05); (3)血脂相关指标:与NC组相比，其余各组血脂水平均出现不同程度异常(P＜0.05);与MC组比较，Met组、DJC-H组的4项血脂指标明显改善(P＜0.05)，而DJC-L组的TG、高密度脂蛋白(HDL)较MC组改善有显著差异(P＜0.05); (4)颈动脉病理形态:通过染色后可见各药物干预组颈动脉血管损伤、血管老化程度较MC组减轻; (5)蛋白表达:WB结果显示与NC组相比，其余各组AMPK、LKB1蛋白表达减少，mTOR、p70S6K、mmp-2、p21表达增加(P＜0.01);与MC组比较，药物干预各组AMPK、LKB1蛋白表达增加，mTOR、p70S6K、mmp-2、p21表达减少(P＜0.01)。 结论: 丹蛭降糖胶囊能够改善气阴两虚夹瘀证DM大血管病变患者的中医临床症状及体征，对糖脂水平、颈动脉粥样硬化有着一定程度的影响。动物实验结果提示丹蛭降糖胶囊在一定程度上降低糖尿病大鼠的糖脂相关指标水平，减轻血管损伤程度，降低相关衰老蛋白表达。其作用机制可能与调控AMPK/mTOR通路以延缓DM大血管病变的进程相关。
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