摘要
目的: 基于中医传承平台(V3.0)软件与cytoscape3.9.1、spss等数据统计分析软件，深度探究上海市名中医刘平教授治疗肝硬化患者的中医用药组方规律及治疗方法，探析中医药治疗肝硬化的学术特点，传承名中医学术思想，为中医临床治疗肝硬化提供思路与参考。 方法: 收集并整理刘平教授在上海中医药大学附属曙光医院与上海中医药大学附属龙华医院2003年3月-2021年12月门诊治疗中的200例肝硬化患者基本信息以及用药处方，利用关联规则、系统聚类分析、复杂网络分析等数据挖掘方法解析处方中用药的频数、性味、归经、功效以及药物组合的配伍规律。 结果: (1)病例基本信息:研究共纳入200名肝硬化患者，其中男性数量为120例，所占比为60％,女性数量为80例，所占比为40％，平均年龄为(55.7±12.2)岁。 (2)病例舌脉统计:将200名肝硬化患者首次就诊以及随访的舌象脉象进行统计，最常见的五种脉象分别为“细、数细、细弦、数细弦、沉细”，最常见的三种舌象为“舌红苔薄、舌红暗薄、舌淡红苔薄”。 (3)性味归经与功效:对200则中药处方进行频次统计，对169味中药进行四气五味与功效归经分析，结果显示，四气为寒性最多，频次频次比为1694/56.62％，其次为温(611/20.42％)，平(520/17.38％),凉(162/5.41％),热(5/0.17％);五味以甘味最多，频次频次比为1794/40.37％，其次为苦(1610/36.23％)，辛(542/12.20％),酸(282/6.35％),咸(216/4.86％);功效以补虚类为主，频次比为1094/36.56％，其次为清热类(737/24.63％)，利水渗湿类(516/17.25％),活血化瘀类(210/7.02％),理气类(158/5.28％);归经以肝经为主，频次比次频次比为1472/16.82％,频次比超过10％的归经按频次比由高到低依次为脾(1352/15.45％)、肺(1323/15.12％)、肾(1058/12.09％)、心(1008/11.52％)、胃(957/10.94％)。 (4)核心处方:使用cytoscape3.9.1软件对频次比大于20％的药物构建复杂网络，复杂网络(ComplexNetwork)是将网络中的分析元素为节点，并研究各个节点之间的关联关系，组成粗细不同的边后构成复杂网络，本研究为将中药药名作为节点，药物使用的关联规则为边，再构建的中药复杂网络中结合中药的特征，并通过比较其网络中心性与边权重得到较为合适的核心处方“生地、白芍、当归、麦冬、白术、茯苓、黄芩、金钱草，”。全方具有“滋阴养肝，柔肝健脾，清热利湿”之功。 (5)疗效评价:数据整理采用Excel,分析统计数据运用SPSS26.0软件，治疗前后的组内比较采用配对样本t检验。结果表明刘平教授治疗肝硬化的核心处方能够改善患者的ALT、AST、γ-GT、PLT等指标。因此核心处方临床应用于肝硬化的治疗有一定的疗效基础。 (6)中药活性成分:利用中药系统药理学分析平台(TCMSP)得到黄芩有32个符合条件的化合物分子，金钱草有10个符合条件的化合物分子，白芍有8个符合条件的化合物分子，当归有2个符合条件的化合物分子，白术有4个符合条件的化合物分子，茯苓有6个符合条件的化合物分子。应用BATMAN-TCM分析工具，结果显示，生地黄有4个符合条件的化合物分子，麦冬有18个符合条件的化合物分子。 (7)药物治疗肝硬化靶点:通过DrugBank(https://www.drugbank.ca/)和PubChem(https://pubchem.ncbi.nlm.nih.gov/)去除重复值，最终得到药物相关靶点624个。通过将“cirrhosis”作为关键词，检索GeneCards(https://www.genecards.org/)和OMIM(http://www.omim.org)数据库，以获得目前已知的与肝硬化相关的疾病靶点。共查询到肝硬化相关靶点5081个。利用在线工具Venn(http://bioinfogp.cnb.csic.es/tools/venny/index.html)得到疾病与药物的交集靶点一共358个。 (7)药物GO富集分析:本研究使用David数据库进行富集GO分析。说化合物靶点-肝硬化靶点经生物过程(biologcalprocess,BP)分析显示，前10位靶点主要参对药物的响应，对异种刺激的响应，对缺氧的响应，基因表达的正向调控，对脂多糖的响应，衰老的响应，对有毒物质的负向调控，凋亡过程等。细胞组分(cellularcomponent，CC)分析发现，靶蛋白主要在线粒体、膜筏、细胞间隙、胞浆、细胞表面、突触后膜、神经元等进行调解。分子功能(molecularfunction,MF)分析显示，靶点主要参与相同蛋白结合、酶结合、RNA聚合酶Ⅱ转录因子活性配体激活序列特异性、DNA结合、氧化还原酶活性、转录因子结合等调节。 (8)KEGG分析:用David数据库进行KEGG通路富集分析，该基因主要调控脂质与动脉粥样硬化、糖尿病并发症中的AGE-RAGE信号通路、癌症中的通路、酒精性肝病、液体剪切应激与动脉粥样硬化、乙型肝炎、前列腺癌、丙型肝炎等信号通路来完成。 结论: 刘平教授在临床治疗肝硬化患者以“益气养阴，清热祛湿，柔肝健脾”为主，并在治疗中结合患者具体症状辨证施治，随症加减。通过对肝硬化用药处方的数据挖掘显示出用药的核心处方“白术、白芍、金钱草，茯苓、黄芩、当归、生地、麦冬”，并对治疗效果进行疗效评价，结果表明，核心处方临床应用于肝硬化的治疗有一定的疗效基础。通过对核心处方的有效成分、信号通路、靶点信息等进行网络药理学分析，说明核心组方中化学成分治疗肝硬化患者的潜在机制。
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