摘要
目的:本研究拟通过分析角蛋白14(Keratin14,KRT14)在黑色素瘤中的表达水平、临床意义及预后价值，探究其在黑色素瘤发生发展中的作用与机制，明确其作为黑色素瘤的潜在预后标志物及治疗靶点的可能性。同时，探讨KRT14在泛癌中的差异表达及其与生存预后、免疫浸润的相关性，为KRT14能否作为泛癌的潜在生物标志物提供参考。 研究方法: 1.利用人类蛋白质图谱(HumanProteinAtlas，HPA)数据库实现KRT14蛋白在正常皮肤组织与黑色素瘤组织中表达水平的比较。 2.基于癌症基因组图谱(TheCancerGenomeAtlas，TCGA)数据库中下载的黑色素瘤样本的表达与临床数据，分析KRT14的表达与黑色素瘤临床特征(T分期、Breslow厚度)、总生存期(OverallSurvival,OS)的相关性，并构建生存预测模型综合评估KRT14的预后价值。 3.使用斯皮尔曼(Spearman)等级相关系数评价KRT14的表达与黑色素瘤免疫细胞浸润水平、肿瘤突变负荷(TumorMutationalBurden，TMB)、微卫星不稳定性(MicrosatelliteInstability，MSI)的相关性。 4.通过基因集富集分析(GeneSetEnrichmentAnalysis，GSEA)预测KRT14在黑色素瘤中可能参与的信号通路。再通过基因本体论(GeneOntology，GO)、京都基因与基因组百科全书(KyotoEncyclopediaofGenesandGenomes，KEGG)富集分析对KRT14高、低表达组间显著差异表达基因的潜在生物学过程及信号通路进行概括。 5.应用相似的研究思路探究KRT14在泛癌中的表达水平及预后价值。 结果: 1.KRT14蛋白在黑色素瘤组织中的表达水平高于正常皮肤组织。 2.KRT14的高表达与黑色素瘤患者晚期临床特征(T4期、Breslow厚度＞3mm)(P＜0.001)及不良预后(P＜0.05)密切相关。单因素与多因素Cox回归分析结果显示KRT14可以作为黑色素瘤预后的独立风险因素(P=0.006，HR=1.07,95％CI:1.02-1.13)。以KRT14为预测指标之一建立的生存预测模型具备良好的预测价值(AUC=0.757)。 3.KRT14的表达水平与黑色素瘤样本中Th17细胞(r=0.216,P＜0.001)、肥大细胞(r=0.317,P＜0.001)的浸润水平呈显著正相关，与B细胞(r=-0.204,P＜0.001)、CD8+T细胞(r=-0.202,P＜0.001)的浸润水平呈显著负相关。此外，在黑色素瘤样本中，KRT14的表达与TMB、MSI均呈负相关(P＜0.05)。 4.KRT14在黑色素瘤中可能与丙酸代谢、脂肪酸代谢、雌激素、皮肤发育等生物学过程及信号通路有关。 5.KRT14在多种肿瘤组织与相应正常组织中存在差异表达，并与多种肿瘤的预后及免疫浸润显著相关。 结论: 1.KRT14在黑色素瘤中高表达，并与晚期临床特征、不良预后密切相关，是黑色素瘤预后的独立风险因素。 2.KRT14可能通过调控免疫浸润过程、参与多种生物学过程及信号通路促进黑色素瘤的发生发展。 3.KRT14可作为黑色素瘤的潜在诊断、预后标志物及治疗靶点，为黑色素瘤的诊治、病情评估、预后预测提供参考，并有将其预后价值推广至泛癌的可能性。
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