摘要
目的:本项实验通过抗菌实验和网络药理学探究金雀异黄酮的抗菌机制，并为金雀异黄酮研制新型制剂，选择最优配方从而增强药物口服吸收，提高药物溶解度和生物利用度。本研究包括金雀异黄酮抗菌活性的探究，网络药理学和分子对接，微乳的制备及表征，为临床试验研究提供部分线索。 研究方法:根据抗菌实验探究金雀异黄酮能否对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌有抗菌作用，根据倍比稀释法确定其MIC值。用网络药理学和分子对接技术预测金雀异黄酮发挥抗菌特性的关键靶点和相关通路。用高效液相色谱仪测定金雀异黄酮在各油相、表面活性剂、助表面活性剂中的溶解度，选择溶解度较高的油相、表面活性剂、助表面活性，通过水滴法确定油相、Km和蒸馏水量，构建伪三元相图。通过对微乳的稳定性、透光率、pH、粒径、PDI系数、电导率和形态学进行微乳的表征实验。 结果:抗菌实验结果显示，金雀异黄酮对金黄色葡萄球菌具有良好的抑制活性，最低抑菌浓度为100μM,对大肠杆菌的抗菌活性较差。网络药理学预测结果显示，金雀异黄酮中发挥抗菌作用的关键靶点可能为ESR1、EGFR、MMP9、PTGS2、MMP2、APP等，GO功能富集分析和KEGG通路富集分析筛选出5-羟色胺能突触、内分泌抵抗、ABC转运蛋白等通路以发挥抗菌作用，分子对接结果显示通过Cytoscape的插件Centiscape2.2筛选出Degree值前三的靶点为ESR1、EGFR、MMP9均有较好的结合能力。通过溶解度结果，选择油相（油酸聚乙二醇甘油酯），表面活性剂（吐温80、辛酸癸酸聚乙二醇甘油酯），助表面活性剂（无水乙醇、1,2-丙二醇、PEG-400）。通过伪三元相图结果选择三个微乳配方（ME-1、ME-2、ME-3），对金雀异黄酮的最大载药量分别为8.62±0.15mg/mL、8.41±0.22mg/mL、8.24±0.19mg/mL,微乳的粒径为24-36nm之间，经过冻融循环和高速离心法鉴定筛选出的微乳具备稳定性，且其pH值、PDI系数、电导率、透光率和形态学均符合微乳的要求。 结论:通过对金雀异黄酮抗菌性能的探究以及作用的潜在靶点和相关通路的预测，为金雀异黄酮抗菌作用机制的研究提供科学依据和参考。对金雀异黄酮微乳的制备和表征，研制出增溶金雀异黄酮的一种既安全又稳定的新型制剂。
NETL