摘要
目的 远志现行质量标准存在操作复杂、薄层色谱(TLC)展开剂中含有管制毒性试剂三氯甲烷、缺乏特征图谱等问题，市售远志药材以远志筒居多，去心过程易导致黄曲霉毒素超标。本文系统表征远志化学成分，分别选定指标成分建立TLC鉴别方法、超高效液相色谱(UHPLC)特征图谱和高效液相色谱(HPLC)含量测定方法，提升远志质量标准，系统分析远志全根、根皮和木心之间的差异性，探讨远志去心的合理性。 方法 基于超高效液相色谱-四级杆-飞行时间/质谱(UHPLC-Q-TOF/MS)仪器、MassHunter数据处理平台及GNPS在线平台快速表征远志化学成分，总结各类成分的裂解规律，鉴定未知化合物，为选定指标成分奠定基础。基于操作简便、绿色低毒理念，系统优化色谱条件，建立TLC鉴别方法;采用UHPLC法建立远志特征图谱;采用HPLC多波长法测定远志碱水解产物芥子酸和细叶远志皂苷含量。依次进行供试品溶液制备方法考察、方法学考察及多批次远志药材的测定。采用上述建立的系列方法结合化学模式识别分析远志全根、根皮和木心的化学成分异同。 结果 通过文献调研建立了远志的专属化学成分PCDL数据库，采用UHPLC-Q-TOF/MS结合自建数据库和分子网络，实现了在45min内对远志化学成分的定性分析，表征94个化学成分，包含8个(口山)酮类，24个蔗糖酯类，19个低聚糖多糖酯类，43个三萜皂苷类，其中2个三萜皂苷类和2个蔗糖酯类为首次鉴定，2个三萜皂苷类化合物为首次在远志中表征，并对远志主要类型化合物的裂解规律进行了总结。 TLC鉴别方法以二氯甲烷-乙酸乙酯-乙醇-水-甲酸(2∶4∶2.5∶1∶0.5)为展开剂，在365nm紫外光下检视2个蔗糖酯类成分，继而采用2％香草醛硫酸-乙醇(1∶9)试液显色并加热至斑点清晰，在可见光下检视远志皂苷B,完成了方法学考察，应用该方法对多批远志药材的质量进行评价，结果显示各批次样品在对照品相应位置均显示清晰斑点。建立了远志的UHPLC特征图谱，指认了28个共有峰，标定7个特征峰，系统优化了供试品溶液制备方法并完成方法学考察，对13批远志样品的特征图谱进行相似性评价，结果显示各批样品与对照指纹图谱的相似度均大于0.9。以远志碱水解产物芥子酸和细叶远志皂苷为指标成分建立远志的HPLC多波长含量测定方法，在2020ChP中提取细叶远志皂苷方法的基础上，系统优化供试品溶液制备方法，完成方法学考察，测定15批远志样品芥子酸和细叶远志皂苷的含量范围分别为0.160％～0.467％和0.95％～3.64％，平均值分别为0.339％和2.81％，按照均值降低30％为依据，建议远志药材按干燥品计算，含芥子酸不得少于0.20％,含细叶远志皂苷不得少于2.0％。 采用UHPLC-Q-TOF/MS、TLC鉴别方法、UHPLC特征图谱结合化学模式识别分析远志全根、根皮和木心的差异性，结果均显示化学成分组成具有一致性，对含量测定结果进行比较，木心碱水解产物芥子酸和细叶远志皂苷含量均小于10％,与UHPLC特征图谱占总峰面积的5.30％～7.52％较为一致，根皮中芥子酸含量高于全根。 结论 通过UHPLC-Q-TOF/MS结合分子网络系统表征远志化学成分，其中6个化学成分为首次鉴定。TLC方法实现了通过一张薄层板对远志蔗糖酯类成分和三萜皂苷类成分的同时鉴别，且斑点清晰、分离度好、信息丰富，相较于药典原有TLC鉴别项，更为低毒、简便。UHPLC特征图谱分析时间短、色谱峰分离度较好、简便高效、准确且稳定性良好。含量测定方法相较于2020ChP现行标准，更为简便，且所选取成分更具有代表性。所建立的方法均适用于远志药材的质量控制。 从化学分析角度说明，远志全根的化学成分主要来源于根皮，木心的存在对其影响较小，而传统抽心过程存在费时、费力，易引起黄曲霉毒素超标等问题，建议远志不做去心处理。
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