摘要
目的:本研究旨在通过建立前庭内侧核(medialvestibularnucleus,MVN)缺氧模型，探讨丹参酮ⅡA对MVN缺氧损伤的药效学作用，以及调控大电导钙离子激活钾通道(big-conductanceCa2+-activatedpotassiumchannels,BKCa)、NO(nitricoxide,NO)及神经元微管相关蛋白2(microtubule-associatedprotein2,MAP-2)的作用及其机制研究，为活血化瘀中药单体丹参酮ⅡA治疗前庭系统缺氧损伤的相关疾病提供新的理论依据。 方法: (1)采用常压动物缺氧饲养舱，以7％氧浓度缺氧6h构建SD大鼠MVN缺氧模型，根据缺氧和给药情况随机分为对照组、模型组和丹参酮ⅡA组(低、中、高剂量组)，通过疲劳转棒实验观察各组大鼠运动平衡功能;尼氏染色观察各组大鼠MVN组织形态学改变。 (2)采用细胞缺氧小室，以2％氧浓度缺氧干预48h构建MVN原代神经元缺氧模型，根据缺氧和给药情况随机分为对照组、模型组和丹参酮ⅡA组(低、中、高剂量组)，分别采用CCK8法检测MVN神经元的细胞活性，激光共聚焦技术观察形态学改变，免疫荧光检测细胞内钙离子浓度，比色法检测NO含量，RT-PCR法检测BKCa-α、MAP-2mRNA表达，Western-blot法检测BKCa-α、MAP-2蛋白表达。 结果: (1)与对照组比较，模型组大鼠疲劳转棒停留时间减少(P＜0.01),MVN神经元细胞数量减少、核固缩、偏移;与模型组比较，丹参酮ⅡA给药后大鼠的运动平衡能力有所恢复，疲劳转棒停留时间延长，且丹参酮ⅡA高剂量组显著增加(P＜0.05），MVN神经元损伤程度减轻。 (2)与对照组比较，缺氧后MVN原代神经元的细胞活性降低(P＜0.05)，神经元突触结构紊乱，突触长度及复杂度降低(P＜0.01),尤其在轴突中段网格状结构明显破坏，细胞内钙离子浓度明显升高(P＜0.01),神经元存活率下降，BKCa-α、NO及MAP-2表达降低(P＜0.01）;与模型组比较，丹参酮ⅡA给药后MVN神经元突触逐渐完整、网格状结构有所恢复，细胞碎片明显减少(P＜0.01)，降低细胞内钙离子浓度(P＜0.01),神经元活性增加(P＜0.01),且促进BKCa-α、NO及MAP-2的表达(P＜0.01)。 结论:缺氧可致大鼠运动平衡障碍，以及MVN神经元损伤，丹参酮ⅡA在一定剂量下增加BKCa蛋白的表达和NO含量，同时促进MAP-2生成，发挥对缺氧MVN的神经保护作用。
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