摘要
目的: 本研究通过meta分析、临床研究与动物实验的结合，完善逍遥散联合五行音乐治疗对肺癌焦虑患者焦虑行为的疗效研究，评价逍遥散联合五行音乐抗焦虑的作用及对细胞因子的影响;建立肺癌焦虑小鼠模型并验证，探索逍遥散联合五行音乐通过改善焦虑行为抑制肺癌发展的生物学基础，为临床进一步应用提供依据。 方法: 1.第一部分音乐治疗干预癌症焦虑抑郁的meta分析:对既往音乐治疗干预癌症焦虑、抑郁的临床研究进行meta分析，共纳入30项随机对照研究，综合评价音乐治疗对焦虑、抑郁情绪量表及生活质量的影响，筛选临床研究适用的量表;进一步对五行音乐的临床研究进行meta分析，采用cochrane评价系统评价各项研究的风险，为音乐治疗的临床研究提供依据。 2.第二部分肺癌患者焦虑情况的特征分析:纳入156名肺癌焦虑患者，主要观察指标为汉密尔顿焦虑量表评分（HAMA）,次要观察指标为一般资料、外周血细胞因子及C反应蛋白。采用Spearman相关性分析、Pearson相关性分析、单因素回归分析、多因素回归分析等方法进行统计分析。 3.第三部分逍遥散联合五行音乐干预肺癌患者焦虑行为的临床随机对照试验:采用前瞻性、同期、平行、对照的研究设计，共纳入患者84名，随机分为试验组44例与对照组40例，试验组予以逍遥散联合五行音乐治疗，对照组仅予逍遥散治疗;逍遥散每日两剂分两次服用;五行音乐治疗每次20min，每日一次;治疗周期为7日。主要评价指标为:汉密尔顿焦虑量表评分（HAMA）,次要评价指标为:状态-特质焦虑量表（STAI）、焦虑自评量表（SAS）、生活质量测定量表中文版情绪功能（EORTCQLQ-C30）;外周血细胞因子。采用t检验，卡方检验，秩和检验等统计学方法对以上指标进行统计学分析。 4.第四部分逍遥散联合五行音乐干预肺癌小鼠行为及抑瘤作用的实验研究:以逍遥散联合五行音乐干预慢性束缚焦虑小鼠，观察体重、高架十字迷宫实验评价逍遥散联合五行音乐对焦虑行为的疗效，比较血清五羟色胺、多巴胺等神经递质的变化;进一步通过慢性束缚焦虑模型与肺癌皮下移植瘤模型的结合，建立肺癌焦虑小鼠模型，并通过小鼠体重等表征、焦虑行为学测试进行造模评价。运用建立的肺癌焦虑小鼠模型，以逍遥散联合五行音乐进行干预，采用高架十字迷宫测试评估行为学变化，测定小鼠血清细胞因子及神经递质变化，观察小鼠肺癌移植瘤生长情况。采用t检验、方差分析等统计方法进行统计学分析。 结果: 1.Meta分析结果显示:（1）音乐治疗对癌症焦虑抑郁患者负性情绪有改善作用（P＜0.05），临床研究主要通过量表评价完成，但各临床试验缺乏客观指标，需要进一步提高临床研究的质量。 2.肺癌患者焦虑情况的特征分析显示:（1）纳入肺癌患者焦虑发生率为89.74％,其中轻度焦虑76人，占焦虑患者的54.29％,中度焦虑62人，占焦虑患者的44.29％，重度焦虑2人，占焦虑患者的1.43％。（2）经Spearman相关性分析发现，年龄、性别、临床分期与肺癌患者焦虑发生存在一定相关性，但均为弱相关。术后3个月以内的患者，焦虑发生与IL-6呈弱负相关（r=-0.211,P=0.048）。术后3个月以外的患者，焦虑发生与IL-1β呈弱正相关（r=0.264,P=0.017），与CRP呈弱负相关（r=-0.341，P=0.002）。术后3个月内患者，IL-1β与CRP呈弱正相关（r=0.307,P=0.004）,TNF-α与CRP呈弱正相关（r=0.390,P=0.000）,IL-6与CRP呈强正相关（r=0.649,P=0.000）;术后3个月外患者，IL-8与CRP呈弱正相关（r=0.246,P=0.029）。（3）经单因素回归分析后，选取性别、年龄、临床分期、IL-1β、IL-6为自变量，焦虑发生为因变量，进行多因素回归分析，得到Logistic模型具有统计学意义，x2=23.162,P=0.001。该模型能够正确分类89.1％的研究对象。模型的敏感度为99.3％,特异度为0.0％。模型纳入的五个自变量中,性别（P=0.026）和IL-1β（P=0.037）有统计学意义。女性肺癌患者发生焦虑的风险比男性高0.226倍。IL-1β值异常的肺癌患者，发生焦虑的风险比正常值患者高0.264倍。 3.遥散联合五行音乐干预肺癌患者焦虑行为的临床随机对照试验:（1）HAMA评分显示，治疗后两组患者焦虑发生率无明显差异（P＞0.05），治疗组焦虑程度、直接评分均低于对照组（P＜0.05）,治疗组紧张、失眠、肌肉系统症状、胃肠道症状均较对照组明显改善（P＜0.05）。治疗组紧张、失眠评分差值较对照组有统计学差异（P＜0.05）。（2）STAI评分中，S-AI评分、T-AI评分与对照组无显著统计学差异（P＞0.05），较治疗前均有差异（P＜0.05）。（3）治疗后治疗组SAS评分较对照组下降（P＜0.05）,C30情绪功能无显著差异（P＞0.05）,较治疗前均有差异（P＜0.05）。（4）与治疗前相比，两组患者IL-1β、IL-6均下降P＜0.05）。 4.逍遥散联合五行音乐干预肺癌小鼠行为及抑瘤作用的实验研究:（1）以慢性束缚法构建焦虑小鼠模型，经逍遥散联合五行音乐治疗干预后，治疗组体重、高架十字迷宫开放臂进入次数、开放臂停留时间均与对照组有差异（P＜0.05）;治疗组ACTH明显降低（P＜0.01），IL-1β水平降低（P＜0.05）。（2）通过慢性束缚7d叠加肺癌皮下移植瘤构建肺癌小鼠焦虑模型，造模第10天，模型组体重、高架十字迷宫开放臂进入次数、开放臂进入时间较对照组均降低（P＜0.05）。（3）以逍遥散联合五行音乐干预肺癌焦虑小鼠14天，发现逍遥散联合五行音乐组高架十字迷宫开放臂进入次数、开放臂停留时间均升高，与模型组逍遥散组存在差异（P＜0.05）、逍遥散联合五行音乐组、逍遥散组小鼠移植瘤瘤体大小、瘤重均较模型组降低（P＜0.05）;IL-1β、IL-6、IL-8、TNF-α水平与模型组有差异（P＜0.05）;逍遥散联合五行音乐组5-HT、DA、NE、GABA水平显著升高，ACTH水平显著降低（P＜0.01）;逍遥散组GABA水平升高（P＜0.05）;逍遥散联合五行音乐组5-HT、DA、NE、GABA水平与逍遥散组相比存在统计学差异（P＜0.05）。经RNA-seq分析，发现逍遥散联合五行音乐可能可以调控p53通路相关基因（Qvalue＜0.05）。 结论: 1.逍遥散联合五行音乐治疗可以改善肺癌患者负性情绪，但其评价尚缺乏公认的客观指标; 2.IL-1β的升高可能提示肺癌患者焦虑情绪，且与之正相关; 3.逍遥散联合五行音乐治疗可能通过降低IL-1β、IL-6改善焦虑情绪。 4.动物实验发现逍遥散联合五行音乐治疗可以减轻肺癌焦虑小鼠焦虑行为，影响血清细胞因子、血清神经递质水平。 5.动物实验发现逍遥散联合五行音乐治疗可能通过调控p53信号通路相关基因表达，在发挥抗焦虑作用的同时，具有抑制肺癌发展作用。
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