摘要
背景:蜱虫因每个生长阶段都需要吸血、更换宿主,且宿主种类繁多,因此蜱虫可携带多种病原体,仅次于蚊子。中国已经鉴定出至少有15种蜱传病原体对人具有致病性,其中包括发热伴血小板减少综合征、Q热、巴贝虫病、斑点热等新发蜱媒传染病。既往研究多为单一地区的单种蜱媒病原体调查,至多为两至三种,缺乏对一定范围内多种蜱媒病原体筛查。 目的:对辽宁省开展蜱虫携带蜱媒病原体调查,掌握辽宁省存在的蜱媒病原体种类及分布,以及分析蜱传疾病可能高发地区和少发地区,为该地区蜱传疾病的防控与检测提供病原体依据,提高医护人员对蜱传疾病的认识和诊出率。通过测序分析,细化辽宁省蜱虫携带立克次体亚种种类,为进一步的深入研究提供数据支持和完善相应的蜱媒传染病防控。 研究方法:(1)研究对象:2022年鞍山市、辽阳市、丹东市及葫芦岛市蜱虫;2021年鞍山市、辽阳市蜱虫;2018年大连市蜱虫;(2)采用人工布旗法和家畜体表摘取法采集蜱虫样本,统计采集地区、时间和数量,对蜱进行形态学鉴定;(3)建立巢式PCR检测方法,开展针对立克次体、发热伴血小板减少综合征病毒(SFTSV)、Q热贝纳柯克斯体、巴贝虫、查菲埃立克体、无形体、莱姆病伯氏疏螺旋体、恙虫病东方体、土拉弗朗西斯菌核酸分子检测;(4)立克次体阳性样本进行一代高通量测序测定病毒基因序列,进一步做遗传进化分析,建立系统发育进化树。 结果:辽宁省五市蜱虫总共检出六种蜱媒病原体,分别为立克次体、巴贝虫、SFTSV、Q热贝纳柯克斯体、无形体和查菲埃立克体,莱姆病伯氏疏螺旋体、恙虫病东方体和土拉弗朗西斯菌均未检出。其中立克次体检出最多,占总检出蜱媒病原体的42.93%;巴贝虫占比为25.00%;SFTSV占比为6.06%,主要分布在大连市和辽阳市;Q热贝纳柯克斯体占比为5.81%,主要集中分布在鞍山市;无形体占比为18.94%;查菲埃立克体占比为1.26%,主要分布在辽阳市。(1)辽阳市立克次体gltA阳性检出率为49.32%,巴贝虫为28.77%,立克次体17kda为65.75%,SFTSV为16.44%,无形体为42.47%,查菲埃立克体为5.48%,其余病原体未检出。(2)鞍山市立克次体gltA阳性检出率为51.90%,巴贝虫为45.57%,立克次体17kda为63.29%,Q热贝纳柯克斯体为25.32%,SFTSV为5.06%,无形体为30.38%,其余病原体未检出。(3)葫芦岛市立克次体17kda阳性检出率为3.23%,Q热贝纳柯克斯体为1.61%,其余病原体均未检出。(4)丹东市立克次体gltA阳性检出率为38.10%,巴贝虫为32.14%,立克次体17kda为64.29%,Q热贝纳柯克斯体为2.38%,SFTSV为1.19%,无形体为14.29%,查菲埃立克体为1.19%。(5)大连市立克次体gltA阳性检出率为57.14%,巴贝虫为53.57%,立克次体17kda为50.00%,SFTSV为25.00%,无形体为28.57%,其余病原体未检出。(6)2021年辽阳市单匹蜱虫检测出立克次体与SFTSV混合感染及立克次体与巴贝虫混合感染;辽阳市不同年份均检出立克次体、巴贝虫、无形体和SFTSV,鞍山市均检出立克次体、无形体和Q热贝纳柯克斯体,证明时间上的一致性。(7)经测序分析,辽宁省蜱虫携带立克次体包含三种,CandidatusRickettsiajingxinensis暂定株普遍存在,劳氏立克次体(Rickettsiaraoultii)分布在辽阳市、鞍山市和丹东市,猫立克次体(Rickettsiafelis)仅大连市和丹东市存在少量蜱虫携带。 结论:本研究检出辽宁省存在蜱媒病原体有立克次体、巴贝虫、Q热、SFTSV、无形体和查菲埃立克体。其中巴贝虫、查菲埃立克体为辽宁省近15年首次检出,提示存在巴贝虫病、人类单核细胞增生性埃立克体病感染可能性。辽南、辽东地区相较辽宁其他地区蜱虫携带蜱媒病原体数量更多、种类更多。辽宁省存在CandidatusRickettsiajingxinensis立克次体暂定株、猫立克次体(Rickettsiafelis)和劳氏立克次体(Rickettsiaraoultii)。