摘要
目的:为调查新疆昌吉地区某猪场腹泻仔猪源大肠杆菌的毒力、系统分群、血清型、致病性以及耐药情况，初步了解新疆昌吉地区某猪场大肠杆菌的流行情况，筛选敏感药物，为临床治疗提供用药方案以减缓大肠杆菌对抗菌药物的耐药性。方法:本研究对154份腹泻仔猪粪便样品进行常规的大肠杆菌分离培养、生化鉴定、特异性引物16SrDNA进行鉴定;采用PCR检测方法鉴定相关毒力因子和黏附素(ST、LT、stx1/2、eae、K88、K99、987P、F18ac、F18ab、F41)、耐药基因(blaCTX-M、blaCTX-M-1G、blaCTX-M-2G、blaCTX-M-9G、blaTEM、blaSHV、tetA、tetE、aac、aadA1、sul1、cml1）的检测;采用多重PCR方法对大肠杆菌进行系统进化分群和O血清型鉴定，用5％无菌脱纤维绵羊血平板检测菌株溶血性，并采用小鼠攻毒试验来检测大肠杆菌的致病力;选取临床上常用的18种抗菌药物(氨苄西林、阿莫西林/克拉维酸、头孢噻肟、头孢他啶、头孢吡肟、哌拉西林-他唑巴坦、亚胺培南、头孢曲松、庆大霉素、氨苄西林-舒巴坦、阿米卡星、左氧氟沙星、环丙沙星、四环素、复方新诺明、氯霉素、多黏菌素B和链霉素)，用Kirby-Bauer(K-B纸片法)检测分离株的药物敏感性。结果:从新疆昌吉某猪场腹泻仔猪粪便样品中共分离到154株大肠杆菌，包括ETEC(n=24)、STEC(n=21)、EPEC(n=1)、EPEC/STEC(n=2)、ETEC/STEC(n=1)和ETEC/EPEC(n=1)，其余不含被检黏附素菌毛和毒力基因104株。系统发育分群结果显示B1群占37％(57/154)、A群占31％(48/154)、C群占14％(22/154)、F群占6％(9/154)、E群占5％(8/154)、D群占3％(4/154)及未知群占4％(6/154)，未检测到B2群。O血清群检测结果显示，定型菌株44株，分别属于10个不同血清型，其中O154、O12、O8、O141和O175为主要流行的血清型。溶血性试验结果显示，有97株(63％)大肠杆菌呈现β溶血。通过小鼠攻毒试验，有14株大肠杆菌的致病力较强。药敏结果显示151株(98％)为多重耐药菌，对复方新诺明、四环素、氨苄西林、链霉素和氯霉素的耐药率在81％～100％,对阿莫西林/克拉维酸、头孢噻肟、庆大霉素、头孢曲松、环丙沙星和阿米卡星的耐药率在31％～66％,对左氧氟沙星、多黏菌素B、头孢他啶、头孢吡肟、氨苄西林-舒巴坦、哌拉西林-他唑巴坦和亚胺培南的耐药率在1％～19％。耐药基因tetA(88％)和cmlA(45％)的携带率较高，而blaCTX-M-1G、aadA1、sul1、aac和blaCTX-M-9G均低于30％，未检测出blaCTX-M-2G、blaTEM、blaSHV和tetE。结论:研究结果表明，新疆昌吉地区腹泻仔猪源大肠杆菌类型复杂，血清群分布广，多重耐药情况严峻，耐药基因流行呈多样化，且检测出人医临床重要的抗生素耐药表型，应加强对猪场大肠杆菌的耐药性监测，为该地区兽医临床用药提供参考。
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