摘要
目的：1.电针刺激疗法对脓毒症相关性脑病小鼠认知能力及海马神经炎症影响；2.细胞自噬在电针减少脓毒症相关性脑病小鼠海马神经元炎症的作用。 方法：健康雄性C57BL/6小鼠160只，8-12周龄，随机选取10只小鼠麻醉后取盲肠内容物制备盲肠浆液，随后断颈处死，采用随机数表法将另外150只小鼠分成5组（n=30）：假手术组（Sham组）、脓毒症组（SEP组）、脓毒症+电针刺激疗法（EA组）、脓毒症+电针刺激疗法+自噬激动剂雷帕霉素组（R组）和脓毒症+电针刺激疗法+自噬抑制剂组3－甲基腺苷组（MA组）。本研究采用腹腔注射小鼠盲肠内容物浆液建立脓毒症模型。分别于造模后2、24、48和72h时对EA组、R组和MA组小鼠行双侧足三里电针刺激，于电针刺激疗法前30min分别对R组和MA组进行腹腔注射自噬激动剂雷帕霉素10mg/kg和自噬抑制剂3-MA15mg/kg。于8～12d每组取10只小鼠进行Morris水迷宫实验检测小鼠学习记忆能力；分别于3d和12d每组取5只小鼠麻醉处死后取海马组织，采用ELISA法检测海马神经元IL-1β、IL-18及TNF-α含量；于12d采用Westernblot法检测海马神经元SQSTM1/p62、Atg16L1、NLRP3的表达水平；于12d采用透射电镜技术观察各组小鼠海马区域自噬小体数量及线粒体形态。 结果：与Sham组比较，所有组别8～12d逃避潜伏期延长，穿越平台次数减少，SEP组及MA组目标象限活动时间缩短，SEP组、EA组及MA组3d及12dTNF-α、IL-1β及IL-18水平均上升，Atg16L1表达下调，p62表达上调，R组3d和12dIL-18、3dIL-1β、水平均上升，所有组别NLRP3均表达上升（Plt;0.05）；与SEP组比较，EA组及R组造模后8～12d逃避潜伏期缩短，目标象限活动时间、穿越平台次数增多，3d及12dTNF-α、IL-1β及IL-18水平下降，NLRP3、p62表达下调，MA组以上指标均上升，EA组及R组Atg16L1表达上调，MA组下调（Plt;0.05），EA组p62表达无明显差异（Pgt;0.05）；与EA组比较，MA组造模后8～12d逃避潜伏期延长，目标象限活动时间、穿越平台次数减少，R组3d及12dTNF-α、IL-1β及IL-18水平下降，NLRP3、p62表达下降，MA组上述指标均上升，R组Atg16L1表达上调，MA组下调（Plt;0.05） 结论：电针可减少NLRP3激活，减轻神经炎症，改善小鼠脓毒症相关性脑病，其机制可能与促进海马神经元自噬有关。
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