摘要
糖是生物最基本的能量来源,是生命新陈代谢的核心,同时是生物体结构的重要组成部分。寡糖衍生物在细胞粘合、表面识别、信号转导和肿瘤转移等许多重要的生理和致病过程中起着至关重要的作用。然而由于糖类分子多个手性,糖苷键的不同位置和可逆共价键,即使只有非常有限的一组单糖,也会呈现出复杂多变的同分异构的可能性。因此,糖类的结构表征研究是一项复杂的任务。通常只有通过费时、费力的酶解、化学衍生化和核磁共振等方法来确定这些结构。 随着近年原位电离质谱技术的飞速发展,糖类化合物的结构分析有了新的方向。然而受限于糖类低离子化效率以及复杂的样品前处理,对于糖类化合物的原位质谱分析目前尚未明确。此外,对于糖类的衍生化结合位点的研究也尚不明确。针对以上问题,本文将从以下几个方面进行研究: (1)利用衍生化试剂3-吡啶硼酸对糖类进行可逆共价衍生,在提高糖类离子化效率的同时还可以对糖类同分异构体进行区分及量化,从而进一步展开对糖类的结构分析。本文使用原位电离质谱技术对葡萄糖和果糖进行了可逆衍生化分析,在利用串联质谱(MS/MS)对葡萄糖和果糖进行结构鉴定的基础上,进一步对食品中的糖类含量进行了研究,并得到了可信性结果。 (2)利用原位电离质谱技术和三重四极杆质谱技术,对3-吡啶硼酸可逆衍生化糖类展开延伸,对常见的二糖和三糖与3-PBA结合形成的单标记和双标记结合产物展开研究,从而应用于更多的糖类化合物。 (3)利用三重四极杆质谱,通过同位素示踪分析,研究了3-吡啶硼酸可逆衍生化葡萄糖的结合位点及解离通道;并利用13C-标记的葡萄糖对食品中的葡萄糖含量进行了研究,得到了与经验结果相吻合的实验结果。 (4)对糖类同分异构体的分析提出了新的手段,利用固相萃取-液相色谱分离技术对食品中的防腐剂进行了分离富集,并对合成的固相萃取柱进行了功能优化,得到了良好的分离效果,之后可以应用于糖类化合物的富集分离。