摘要
目的 建立操作流程简便、检测灵敏度高的量子点侧流层析技术，实现集成化检测新型冠状病毒、甲型流感病毒、乙型流感病毒、腺病毒的方法。 方法 1、使用N-羟基琥珀酰亚胺（NHS）和1-乙基-3-（3-二甲基氨基丙基）碳二亚胺盐酸盐（EDC）作为活化剂，将量子点荧光微球与病毒抗体进行偶联。 2、在硝酸纤维素（NC）膜上以羊抗鼠IgG抗体作为质控线，呼吸道病毒捕获抗体作为检测线，通过优化标记与捕获抗体含量来提升试纸条的性能。 3、615nm红色量子点（QBs）分别偶联新型冠状病毒（SARS-CoV-2）、甲型流感病毒（IAV）、乙型流感病毒（IBV）、腺病毒（ADV）4种抗体并制备相对应的四种免疫层析试纸条，组装至多通道免疫层析柱中集成化检测上述4种呼吸道病毒，使用多通道免疫层析检测仪检测荧光信号。 结果 1、SARS-CoV-2、IAV、IBV和ADV的抗原线性范围分别为0.01～100ng/mL、0.05～100ng/mL、0.5～100ng/mL、1～1000ng/mL。检测限分别为0.01ng/mL、0.05ng/mL、0.31ng/mL、0.40ng/mL,与胶体金免疫层析相比有较好的灵敏度。 2、对4种病毒样本进行重复性检测，变异系数分别为6.09％、2.24％、7.92％和12.43％,表明该方法具有良好的稳定性。每种呼吸道病毒抗原分别进行高、中、低3个浓度检测，回收率为90.67％～105.85％，证明本研究方法具有良好准确性。 3、将待测的呼吸道病毒和其他几种呼吸道病原体进行不同组合进行检测，均未发生交叉反应，验证了检测系统具有良好的特异性。 4、使用模拟临床咽拭子样本进行PCR和侧流层析技术两个方法检测，临床验证了本实验具有临床可行性。 结论 量子点侧流免疫层析方法实现了针对SARS-CoV-2、IAV、IBV和ADV四种呼吸道病毒的集成化检测，流程简单、成本较低、检测速度快，灵敏度高，可应用于咽拭子样本，是一种理想的呼吸道病毒筛查方法。
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