摘要
目的: 肝细胞癌的发生发展受多种信号通路的调控，而肿瘤干细胞样特性是肝癌进展过程中的重要表现。TM4SF1(amemberofthetransmembrane4superfamily)已被证明在多种癌症中表达上调，同时可能对肿瘤干细胞样特性产生促进作用。本研究将阐明TM4SF1通过上调MYH9激活NOTCH通路促进肝癌干细胞样特性的分子机制，同时探索TM4SF1对肝癌仑伐替尼耐药的影响。 方法: 从癌症基因组图谱(theCancerGenomeAtlas，TCGA)和Timer2.0等数据库中获取TM4SF1在肝癌中的mRNA表达水平。借助GEPIA等数据库分析蛋白间的相关性。采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)、蛋白印迹蛋白和免疫组织化学染色分别从mRNA水平、蛋白水平和组织水平检测分子的表达情况。球体形成实验和侧群细胞的检测和分选用于评估HCC细胞的肿瘤干细胞样特性。裸鼠皮下成瘤实验用于评估TM4SF1在体内对肝癌细胞肿瘤干细胞样特性及仑伐替尼耐药的影响。采用蛋白质谱技术分析TM4SF1的下游因子，并结合CO-IP实验验证分子之间的相互作用。采用CCK-8实验检测TM4SF1对肝癌细胞仑伐替尼耐药的影响。 结果: TM4SF1在肝癌中表达上调，TM4SF1高表达与肝癌患者的不良预后呈正相关。在肝癌细胞中敲除TM4SF1有效抑制了细胞的肿瘤干细胞样特性，同时下调了肝癌细胞肿瘤干细胞样特性相关蛋白标志物的表达而且，敲除TM4SF1降低了裸鼠皮下成瘤的能力。分子机制上，TM4SF1能够上调MYH9的表达并激活NOTCH通路。在耐药方面，TM4SF1能够对肝癌细胞仑伐替尼耐药起到促进作用。 结论: TM4SF1上调MYH9激活NOTCH通路促进肝癌干细胞样特性和仑伐替尼耐药。
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