摘要
目的 研究罗沙司他对大鼠心肌缺血再灌注损伤（MIRI）的保护作用及机制。 方法 32只健康雄性大鼠随机分为4组:①假手术组（Sham组）;②缺血再灌注损伤模型组（MIRI组）;③模型+罗沙司他低剂量组（10mg/kg·d）;④模型+罗沙司他高剂量组（25mg/kg·d）。各组大鼠均正常饮食一周，其中低剂量组和高剂量组分别给予相应剂量的罗沙司他溶液，日一次，共7日。通过阻断左冠状动脉前降支30分钟，再灌注90分钟，建立心肌缺血再灌注损伤模型。采用酶联免疫吸附法（ELISA）测定心肌的乳酸脱氢酶（LDH）和肌酸激酶同工酶（CK-MB)含量。通过氯化硝基四氮唑蓝（NBT）染色测定心肌梗死面积。苏木精-伊红（HE）染色测心肌细胞损伤。蛋白免疫印迹杂交（WB）法测定促凋亡蛋白Bax的表达和抑制凋亡蛋白Bcl-2的表达。 结果 1、心功能的影响:与假手术组比，模型组LDH和CK-MB的含量显著升高（P＜0.01）;与模型组相比，罗沙司他组的LDH和CK-MB水平明显下降（P＜0.01）。与罗沙司他低剂量组相比，罗沙司他高剂量组LDH（P＜0.05）和CK-MB（P＜0.01）含量呈现下降趋势，差异有统计学意义。 2、心肌梗死面积:与假手术组比较，模型组的心肌梗死面积占总心肌面积的比值为79.75％±8.09％,罗沙司他低剂量组占比为38.40％±11.72％，罗沙司他高剂量组占比12.2％±8.47％,差异显著，有统计学意义（P＜0.01）。与低剂量组相比，高剂量组的梗死面积呈现下降趋势（P＜0.05）,差异有统计学意义。 3、心肌病理改变:HE染色结果显示，假手术组心肌纤维排列整齐，间质中没有红细胞及炎性细胞的存在。缺血再灌注模型组心肌细胞排列杂乱无章，胞浆水肿破裂，心肌纤维断裂，形态紊乱，间质明显可见细胞间隙增宽和水肿，可见大量的炎性细胞浸润和红细胞的外渗。罗沙司他组的形态学改变介于两者之间，受损程度没有缺血再灌注模型组严重，只看到少量的炎性细胞浸润和红细胞渗出，心肌细胞排列略有杂乱，罗沙司他对心肌形态学有明显改善，尤其是在高剂量罗沙司他组。 4、促凋亡蛋白Bax表达:与假手术组相比，模型组大鼠心肌Bax蛋白表达明显增加(P＜0.01);与模型组相比，罗沙司他组的Bax蛋白表达显著下降(P＜0.01);与罗沙司他低剂量组相比，罗沙司他高剂量组的Bax蛋白表达下降更明显(P＜0.01)，差异有统计学意义。 5、抗凋亡蛋白Bcl-2表达:与假手术组相比，模型组大鼠心肌Bcl-2蛋白表达较少(P＜0.01);与模型组相比，罗沙司他组的Bcl-2的蛋白表达较多(P＜0.01);且与罗沙司他低剂量组相比，罗沙司他高剂量组的Bcl-2蛋白表达增加的更明显(P＜0.01)，差异有统计学意义。 结论 1、在成功复制大鼠心肌缺血再灌注损伤模型的基础上，本实验证实罗沙司他预处理对缺血再灌注损伤有保护作用。 2、心肌缺血再灌注损伤前罗沙司他的预处理，可以通过调节凋亡途径内促凋亡Bax蛋白、抗凋亡Bcl-2蛋白在细胞内的水平来起到保护作用。
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