摘要
阿尔兹海默病(Alzheimer''sdisease,AD)是一种以认知功能障碍为主要特征的神经退行性疾病。GWAS全基因组关联分析PTK2B基因是AD的一个风险因子。酪氨酸蛋白激酶2β(Proteintyrosinekinases2beta,PTK2B)又称Pyk2,在脑内主要表达在神经元和小胶质细胞中，是一种非受体自磷酸激活的胞质蛋白激酶，在细胞的增殖、生长和分化中发挥着重要作用。目前对Pyk2的研究主要集中在神经元中，而对其在小胶质细胞中的功能知之甚少。基于此，本研究希望通过Pyk2调控小胶质细胞功能的研究，探究其对AD病理机制的影响。 在本研究中，我们在AD模型小鼠中通过免疫荧光与Aβ淀粉样斑块共定位发现，激活的磷酸化Pyk2主要集中在Aβ斑块周围，与小胶质细胞存在明显的共定位。通过免疫荧光实验，我们发现Pyk2缺失的小胶质细胞增殖不受影响，但其细胞形态发生改变，胞体变小，分支增多，呈现出更加静息不易被激活的状态。之后通过Transwell实验，我们发现Pyk2缺失小胶质细胞的迁移能力显著下降，并且对Aβ的响应能力减弱。于是，我们利用脑立体定位注射技术向小鼠脑内注射Aβ，通过免疫荧光，观察到一致结果，Pyk2缺失的小胶质细胞向Aβ部位募集减少。之后我们运用免疫荧光和流式细胞技术证实了Pyk2缺失后，小胶质细胞对Aβ的吞噬能力也减弱。通过进一步探索，我们发现Pyk2可能通过调控Rac1/cdc42信号通路调控小胶质细胞的功能。TREM2是脑中主要表达在小胶质细胞上的受体，其突变已被证实增加AD患病风险。我们通过免疫共沉淀实验发现Pyk2与TREM2之间存在相互作用关系，并且在TREM2缺失的小鼠皮层中Pyk2激活减少，推测Pyk2可能是TREM2的下游信号分子，但需要进一步研究证实。 本课题的研究表明AD风险因子Pyk2可以调控小胶质细胞的激活、迁移和对Aβ的吞噬，并可能作为TREM2的下游信号分子介导其在AD中的病理机制，为揭示AD复杂的病理机制提供了新的线索，也为AD的预防和治疗提供了潜在靶点。
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