摘要
目的:随着全球人口老龄化程度的加重，骨质疏松每年为社会带来巨大的财政负担，越来越受到人们的重视。骨质疏松的原因是成骨过程以及破骨过程的平衡被打破。骨髓间充质干细胞(BMSCs)功能异常在该过程中起着重要作用。本研究旨在探讨钙营养蛋白1(Calneuron-1，CALN1)是否可以调节BMSCs成骨分化。 方法:我们采用cDNA过表达C3H10和MC3T3-E1细胞系中的CALN1。利用westernblotting、qRT-PCR，检测经典成骨分化标志物如ALP、RUNX2、Col1a1、OCN的表达水平。对C3H10、MC3T3-E1进行成骨诱导，并用AR-S和Alp染色对成骨分化程度进行量化。利用转录组测序技术对CALN1过表达后的C3H10进行测序分析，确定相关信号通路。最后，利用Westernblotting、qRT-PCR技术检测PI3K/Akt以及成骨标志物表达水平。 结果:对CALN1过表达的C3H10以及MC3T3-E1细胞系进行成骨诱导，并进行AR-S和Alp染色，成骨过程中，过表达组较对照组染色深;Westernblotting、qRT-PCR实验验证成骨经典标志物RUNX2、Col1a1、OCN以及ALP表达水平较对照组均上调。对CALN1过表达的C3H10进行转录组测序，KEEG提示PI3K/Akt通路改变较为明显。Westernblotting、qRT-PCR验证PI3K/Akt水平上调;过表达CALN1的C3H10、MC3T3-E1、PI3K/Akt水平较对照组升高;加入PI3K抑制剂组上述标志物水平同对照组相近。 结论:CALN1通过调节PI3K/Akt信号通路调控成骨分化;CALN1可能作为治疗骨质疏松的潜在靶点
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