摘要
目的: 本研究通过观察“醒脑开窍”针刺法并用补阳还五汤对MCAO模型大鼠脑梗死面积、脑组织含水量、血脑屏障通透性及紧密连接蛋白occloudin、claudin-5的影响，探究针药并用对脑梗死的部分治疗机制。 方法: SPF级SD大鼠随机分为假手术组及手术造模组，选取大脑中动脉栓塞法造成脑梗死模型，术后成模大鼠二次随机分成模型组、针刺组、药物组、针药组。针刺组选取“人中、内关、三阴交”穴，药物组予补阳还五汤灌胃，针药组与假手术组均针刺并补阳还五汤灌胃，模型组只抓取固定不予干预，针刺、固定操作每次20min,每日2次，中药灌胃0.6ml/100g/只给药，每日1次，持续5天。干预后，采用TTC法染色检测脑组织梗塞面积、干湿重法检测脑组织含水量、伊文思蓝（EB）法检测 BBB 通透性、Western blot 检测 occludin、claudin-5表达水平。 结果: 1.脑梗死面积:术后3d，模型组、针刺组、药物组、针药组组间差异不明显（P＞0.05）;术后5d,针药组比针刺组脑梗面积明显减小（P＜0.05）。 2.脑组织含水量检测:术后3d、5d两个时间点，与假手术组相比，模型组脑组织含水量增加（P＜0.01）;术后3d,与模型组相比，针刺组、药物组组间含水量无差异（P＞0.05）;针药组比模型组脑组织含水量显著减少（P＜0.05），针药组比针刺组、药物组脑组织含水量均减少，差异不明显（P＞0.05）;术后5d,模型组、针刺组、药物组、针药组组间差异不显著（P＞0.05）。 3.血脑屏障通透性检测:术后3d、5d两个时间点，与假手术组相比，模型组脑组织EB含量增加（P＜0.01）;术后3d，与模型组相比，针刺组、药物组、针药组组间差异不明显（P＞0.05），针药组比针刺组、药物组EB含量减小，差异无统计学意义（P＞0.05）;在5d，与模型组相比，针刺组、药物组、针药组脑组织EB含量均显著下降（P＜0.01）,针刺组、药物组、针药组组间比较无明显差异（P＞0.05）。 4.血脑屏障紧密连接蛋白occludin、claudin-5表达检测: ①occludin蛋白表达:在3d,假手术组、模型组、针刺组、药物组、针药组组间差异不明显（P＞0.05）;在5d，与假手术组相比，模型组occludin表达量显著减少（P＜0.05），与模型组相比，针药组occludin蛋白表达增加（P＜0.01）,与模型组相比，针刺组、药物组组间差异不明显（P＞0.05）,与针刺组、药物组相比，针药组occludin蛋白表达水平明显上升（P＜0.01、P＜0.05）。 ②claudin-5蛋白表达:术后3d、5d,与假手术组相比，模型组大鼠脑组织claudin-5含量差异无统计学意义（P＞0.05）;术后3d,模型组、针刺组、药物组、针药组组间差异无统计学意义（P＞0.05）;术后5d,与针刺组、药物组相比，针药组claudin-5蛋白表达上升，差异无统计学意义（P＞0.05）。 结论: 1.醒脑开窍针法并用补阳还五汤可有效缩小大鼠脑梗死面积。 2.醒脑开窍针法并用补阳还五汤可减轻大鼠脑水肿。 3.醒脑开窍针法并用补阳还五汤可降低血脑屏障通透性。 4.醒脑开窍针法并用补阳还五汤可能通过促进血脑屏障紧密连接蛋白occludin的表达来减轻BBB损伤。
NETL