摘要
目的：本课题以前列舒通胶囊为研究对象，通过建立慢性非细菌性前列腺炎（CNP）的人前列腺上皮细胞（RWPE-1）模型和大鼠动物模型，来探讨前列舒通胶囊抗CNP的作用机制，为临床应用提供依据。 方法：1.采用化学刺激法构建大鼠CNP整体动物模型，1周后给药，空白组和模型组均给予0.9%生理盐水溶液，给药组分别为前列舒通胶囊低（0.32g·kg-1）、中（0.64g·kg-1）、高剂量组（1.28g·kg-1），阳性药组为普乐安片（0.61g·kg-1），连续灌胃4周，腹主动脉取血和前列腺组织取材。分别对各组前列腺组织进行称重，考察其前列腺指数，运用HE染色法观察前列腺组织病理变化，ELISA法检测血清和组织中IL-6、IL-1β、TNF-α的含量，Western Blot法考察PI3K、p-PI3K、Akt、p-Akt、NF-κB、p-NF-κB、OCLN蛋白的表达，RT-PCR法检测前列腺组织中PI3K、Akt、NF-κB mRNA的含量。 2.利用血清药理学研究手段对前列舒通胶囊含药血清样品进行制备，大鼠连续给药1.28g·kg-1，1周后，腹腔注射25%乌拉坦进行麻醉，腹主动脉取血，离心取上清。采用10ng/mL脂多糖（LPS）诱导RWPE-1细胞异常增殖，构建CNP细胞增殖模型，实验分为空白组、模型组、低剂量（体积浓度为2.5%）、中剂量（体积浓度为5%）、高剂量（体积浓度为10%）含药血清组。运用CCK-8法考察不同浓度的前列舒通胶囊含药血清对LPS诱导RWPE-1细胞增殖的抑制作用，ELISA法检测RWPE-1细胞中白细胞介素-6（IL-6）、白细胞介素-1β（IL-1β）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）炎症因子的含量，Western Blot法考察前列舒通胶囊含药血清对RWPE-1细胞中PI3K、p-PI3K、Akt、p-Akt、NF-κB、p-NF-κB蛋白表达的影响。 结果：1.体内实验：前列舒通胶囊改善了体重增长缓慢、前列腺组织湿重及指数的升高；HE结果显示，前列舒通胶囊改善了CNP大鼠前列腺组织上皮增厚、管腔折叠、炎性细胞浸润等症状；ELISA结果表明，前列舒通胶囊可降低CNP大鼠血清和前列腺组织中IL-6、IL-1β、TNF-α炎性细胞因子的释放；Western Blot结果表明，前列舒通胶囊可抑制CNP大鼠前列腺组织中PI3K、Akt、NF-κB蛋白磷酸化表达明显上升，并促进PI3K、Akt、NF-κB和OCLN蛋白的表达；RT-PCR结果显示，前列舒通胶囊可促进CNP大鼠前列腺组织中PI3K、Akt、NF-κB mRNA的表达。 2.体外实验：CCK-8结果表明前列舒通胶囊含药血清对CNP细胞异常增殖有良好抑制作用；ELISA结果显示前列舒通胶囊含药血清能显著降低RWPE-1细胞中IL-6、IL-1β、TNF-α炎症因子水平；Western Blot结果表明前列舒通胶囊含药血清能够上调RWPE-1细胞中PI3K、Akt、NF-κB蛋白表达水平，同时下调PI3K、Akt、NF-κB蛋白磷酸化表达含量。 结论：1.前列舒通胶囊能够改善CNP大鼠前列腺组织的病理形态和变化，可抑制PI3K/Akt/NF-κB信号通路磷酸化蛋白以及炎症因子的释放，同时可上调紧密连接蛋白OCLN的表达来发挥抗CNP的作用机制。 2.前列舒通胶囊含药血清对CNP细胞异常增殖具有抑制作用，主要是通过抑制PI3K/Akt/NF-κB信号通路磷酸化蛋白的表达和降低炎症因子的释放来发挥抗CNP的作用机制。 综上所述，前列舒通胶囊主要通过抑制PI3K/Akt/NF-κB信号通路的激活、降低炎症因子的释放以及上调OCLN的表达发挥抗CNP的作用机制，阐明了前列舒通胶囊治疗CNP的科学内涵，为前列舒通胶囊的临床应用提供更加完善的理论基础。
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