摘要
目的：通过体内和体外实验探讨通关藤苷 G（Tenacissoside G，TG）对骨关节炎（Osteoarthritis，OA）的影响及其作用机制。 方法：观察不同浓度 TG对于 IL-1β（20 ng/ml）诱导的小鼠原代软骨细胞的作用。从5天鼠龄的C57BL/6乳鼠中提取原代软骨细胞用于搭建体外骨性关节炎模型。使用CCK-8法测定TG对于小鼠软骨细胞的毒性影响，最终选用2.5μM、5μM、10μM三个浓度作为给药浓度；软骨细胞经过不同浓度的TG预处理2小时后再用 IL-1β诱导 24h，使用 qPCR检测 TG对 OA小鼠软骨细胞中 MMP-13、MMP-3、TNF-α、iNOS mRNA表达水平的影响。Western blot检测TG对OA软骨细胞中Collagen-II、MMP-13蛋白水平表达的影响。免疫荧光法检测TG对OA软骨细胞中II型胶原蛋白的保护作用。 选取 40只 10周的雄性 C57BL/6小鼠随机分为假手术组、DMM对照组、三个不同浓度的TG给药组，其中DMM对照组和TG给药组右膝关节实施DMM手术建立小鼠OA体外模型，通过Micro-CT、小鼠膝关节组织样本染色、OARSI评分等观察评定TG在体内对OA的影响。Western Blot检测TG对OA软骨细胞中NF-κB信号通路的调控作用。 结果：体外实验表明TG能显著抑制OA软骨细胞中的炎性细胞因子iNOS、TNF-α、MMP-3、MMP-13的基因表达水平的升高；TG可以保护OA软骨细胞中II型胶原蛋白的降解；TG可以抑制经由IL-1β诱导的OA软骨细胞中NF-κB信号通路的活化。体内实验表明 TG延缓小鼠膝关节 OA的病情进展。Micro-CT结果显示TG可以减少OA小鼠膝关节胫骨软骨下骨中骨量丢失；HE染色、SO染色和免疫组化染色结果显示TG可以减少关节软骨中蛋白聚糖和II型胶原的丢失；TG可以减轻关节软骨损伤并降低OARSI评分。 结论：TG 可能通过调节 NF-κB 信号通路在体内和体外显著小鼠软骨细胞中炎性细胞因子的释放，并抑制软骨外基质降解，维持关节软骨稳定，延缓 OA 的病程进展。
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