摘要
目的： 探讨苯并咪唑出芽抑制解除同源物蛋白1（BUB1）与BUB1有丝分裂检查点丝氨酸/苏氨酸激酶B（BUB1B）在子宫内膜癌（EC）中的表达和临床意义，为EC的诊断和治疗提供理论依据。 方法： 1、泛癌分析：利用生物信息学方法分析BUB1和BUB1B基因在TCGA队列中不同肿瘤中的表达情况；BUB1和BUB1B表达水平不同肿瘤的预后关系；在不同癌症和邻近组织中的甲基化水平；与各种肿瘤之间免疫细胞浸润的关系。构建BUB1和BUB1B相关基因蛋白互作网络，并进行GO/KEGG富集分析。 2、细胞实验：采用siRNA干扰技术沉默子宫内膜癌Ishikawa细胞系中BUB1和BUB1B基因，采用qPCR法检测转染效率；利用CCK8实验检测各组细胞增殖；划痕实验检测细胞迁移；Transwell小室细胞侵袭实验检测侵袭。各组细胞数据比较采用单因素方差分析和LSD-t 检验。 3、生信分析和免疫组化：收集20例EC患者癌症组织和癌旁组织，免疫组化检测BUB1和BUB1B表达；生物信息学方法分析BUB1和BUB1B与子宫内膜癌患者临床特征、预后及免疫浸润的关系。 结果： 1、泛癌分析：BUB1与BUB1B在BLCA、BRCA等26种癌症中高表达。BUB1的高表达与包括ACC、KIRC在内的8种癌症的OS有关，与包括ACC、KIRC在内的10种癌症的DFS有关（P＜0.05）。BUB1B的高表达与包括ACC、KIRC在内的9种癌症的OS有关，与包括ACC、CHOL在内的11种癌症的DFS有关（P＜0.05）。BLCA、KIRP等癌症中BUB1甲基化水平明显降低，ESCA、BRCA等癌症中BUB1甲基化水平明显升高（P＜0.05）。BLCA、BRCA等癌症中BUB1B的甲基化水平明显降低，KIRC、KIRP等癌症中BUB1B的甲基化水平明显升高（P＜0.05）；BUB1在黑色素瘤、EC、膀胱癌基因改变频率较高，以突变为主（＞5%）。BUB1B在EC、黑色素瘤基因改变频率较高，以突变为主（＞5%）。BUB1表达水平与BRCA、TGCT的CAF的浸润及BRCA、KIRC等癌症的内皮细胞浸润呈负相关，与COAD的中性粒细胞及KIRP、LGG的内皮细胞浸润呈正相关。BUB1B表达水平与BRCA、HNSC-HPV+等癌症的CAF的浸润及BRCA、KIRC等癌症的内皮细胞浸润呈负相关。BUB1和BUB1B及相关基因在正常组织和肿瘤组织的细胞周期中富集。 2、细胞实验：BUB1-siRNA组和BUB1B-siRNA组的Ishikawa细胞增殖能力（P＜0.05）、迁移能力（P＜0.05）及侵袭能力明显下降（P＜0.05）。 3、免疫组化和生信分析：BUB1和BUB1B在EC中高表达；BUB1高表达与EC患者年龄（P=0.046）、组织学分级（P＜0.001）、临床分期（P＜0.001）、转移程度（P=0.024）、组织学类型（P＜0.001）相关。BUB1B高表达与EC患者组织学分级（P＜0.001）、临床分期（P=0.002）、组织学类型（P＜0.001）相关；BUB1 mRNA高表达显著缩短EC患者的OS（P=0.00036）和RFS（P=0.0011）。BUB1B mRNA高表达显著缩短EC患者的OS （ P=0.0024 ） ，但对RFS无影响（P=0.064）；6% 的EC发生了错义突变、扩增和深度缺失等BUB1、BUB1B基因改变。BUB1表达水平与活化CD8+T 细胞（r=-0.157），活化CD4 +T 细胞等免疫细胞浸润及ADORA2A（r=-0.232），CD244（r=-0.251）等免疫调节剂相关。BUB1B的表达水平与CD8+T 细胞（r=-0.146），CD4 +T 细胞（r=0.556）等免疫细胞浸润及ADORA2A（r=-0.283），CD244（r=-0.232）等免疫调节剂相关。 结论： 1、BUB1和BUB1B及其相关基因在多个癌症相关通路中富集，BUB1和BUB1B在多种实体肿瘤中高表达并影响预后，并与多种癌症的免疫浸润有关。 2、BUB1和BUB1B在EC组织中高表达，通过影响EC细胞的增殖、迁移和侵袭能力，影响EC的发生发展。 3、BUB1和BUB1B表达量与EC分期、分级和组织学类型等多个临床病理特征相关；BUB1和BUB1B与EC预后、免疫浸润及免疫调节剂密切相关，有望成为新的预后及免疫治疗靶点。
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