摘要
目的：分析我院耐碳青霉烯肠杆菌目细菌(Carbapenem-resistant Enterobacterales,CRE)的临床分布特征，评估碳青霉烯酶抑制剂增强试验和碳青霉烯耐药基因检测试验两种方法分析肠杆菌目细菌产碳青霉烯酶的临床应用价值。 方法：首先采用WHONET 5.6软件对2020至2022年间分离的CRE菌株进行样本来源和对抗菌药物的体外敏感性分析;用碳青霉烯酶抑制剂增强试验分析我院2021年2月至2022年6月从临床样本中分离的372株CRE菌株的碳青霉烯酶表型;再用荧光PCR法检测2021年2月至2022年6月从临床样本中分离的372株CRE菌株和2020年1月至2021年1月收集的132份临床样本中五种碳青霉烯耐药基因(blaKPC、blaNDM、blaIMP、blaVIM、blaOXA-48)携带情况;最后比较两种方法对2021年2月至2022年6月期间372株CRE菌株的检测结果的一致性。 结果：2020-2022年，我院CRE菌株分离阳性率分别为7.24％(155/2141)、8.17％(248/3036)和 9.42％(306/3248),呈逐年上升趋势。其中，以耐碳青霉烯肺炎克雷伯菌和耐碳青霉烯大肠埃希菌的检出为主，2022年耐碳青霉烯肺炎克雷伯菌的分离阳性率高达23.08％(223/966)。碳青霉烯酶抑制剂增强试验结果显示，372株CRE菌株中，产A类丝氨酸碳青霉烯酶250株(67.20％),产B类金属β内酰胺酶96株(25.81％)，有26株(6.99％)为不产A类丝氨酸酶或B类金属β内酰胺酶。372株CRE菌株中，荧光PCR法检出333株（92.3％）携带碳青霉烯耐药基因，其中234株（62.90％）携带blaKPC基因，96 株（25.81％）携带 blaNDM基因，携带 blaIMP、blaKPC+NDM、blaOXA-48基因的各有1株。未检出携带blaVIM基因的菌株。132份临床样本中，荧光PCR法共检出131份携带相关的碳青霉烯耐药基因，其中106份样本检出blaKPC基因，21份样本检出blaNDM基因，1份样本检出blaIMP基因，3份样本同时检出blaKPC和blaNDM基因，一份样本检测结果为阴性。两种检测方法相比较，碳青霉烯酶抑制剂增强试验和荧光PCR法对单产A类丝氨酸碳青霉烯酶的检测结果分别为250株、234株，对单产B类金属β内酰胺酶的检测结果分别为96株、97株。两种检测方法在两种酶型检测结果的一致性检验Kappa值分别为0.788（p＜0.05）、0.797（p＜0.05），具有良好的一致性。 结论：2020-2022年，我院CRE菌株分离阳性率逐年上升，以耐碳青霉烯肺炎克雷伯菌和耐碳青霉烯大肠埃希菌的检出为主。碳青霉烯酶抑制剂增强试验和荧光PCR法对碳青霉烯酶型别检测都有较高的临床检测效能。其中，碳青霉烯酶抑制剂增强试验可有效区分菌株产A类或B类碳青霉烯酶，成本低，操作简便，结果容易判读。其不能检测D类OXA-48型碳青霉烯酶及在产生ESBLs和或AmpC合并膜孔蛋白下调或缺失的菌株检测上的缺点需留意。荧光PCR法可检测菌株的碳青霉烯耐药基因携带情况，也可直接定性检测临床样本中的碳青霉烯耐药基因携带情况且检测结果总一致性较好，结果容易判断，时效快，可更快速地为临床诊疗提供指导和依据。但该方法对耐药基因的检测存在假阴性的情况，需要我们留意。
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