摘要
本论文主要研究了不同生育期不同时间刈割的柱花草青贮发酵品质和微生物群落的多样性，并从柱花草鲜草和其青贮饲料中筛选耐高温乳酸菌，探讨筛选的乳酸菌对柱花草青贮发酵品质和微生物群落的影响，旨在为热带地区调制柱花草优质青贮饲料提供理论依据。研究结果如下: 试验1刈割时间对柱花草青贮品质的影响 本试验由三部分内容组成。 ①研究了柱花草原料特性及附着微生物数量变化。结果表明:在一天之中随着刈割时间的推迟，柱花草的干物质、水溶性碳水化合物和粗蛋白含量呈上升趋势，中性洗涤纤维和酸性洗涤纤维含量呈降低趋势;对于不同生育期的柱花草，盛花期柱花草的干物质、粗蛋白、中性洗涤纤维和酸性洗涤纤维含量以及肠杆菌、霉菌和酵母菌的数量均高于营养生长期和初花期的柱花草，而碳水化合物含量低于营养生长期和初花期的柱花草。 ②研究了生育期和刈割时间对柱花草青贮发酵品质的影响。结果表明:营养生长期柱花草因其含水量较高，青贮后有大量氨态氮和丁酸的产生，发酵品质较差。8:00刈割的初花期柱花草青贮发酵品质较差，在推迟刈割时间后，青贮后的丁酸和氨态氮的含量降低，并且能保留更多的水溶性碳水化合物。盛花期柱花草因其水溶性碳水化合物较低，在青贮前期pH值下降速度慢，粗蛋白损失严重，并且主要为丙酸发酵。 ③研究了刈割时间对柱花草青贮饲料微生物群落的影响。结果表明:青贮60d后，乳杆菌属（Lactobacillus)主要存在于营养生长期和初花期柱花草，其相对丰度随着刈割时间的推迟而增加;在8:00刈割的营养生长期柱花草青贮饲料中的乳酸菌除了乳杆菌属(Lactobacillus)还检测到较高丰度的片球菌属(Pediococcus）;梭菌主要存在于12:00刈割的营养生长期柱花草、8:00刈割的初花期柱花草和盛花期的柱花草中，并且梭菌也是盛花期柱花草青贮饲料中的优势菌属。 试验2柱花草中耐高温乳酸菌的筛选 采用传统微生物培养、分离方法，结合16s rRNA基因鉴定技术和二代测序技术，筛选柱花草鲜草及其青贮饲料中的主要耐高温优质乳酸菌。结果表明:从柱花草鲜草和青贮饲料中共筛选出了7株可耐受45℃高温、7.5％NaCl盐度、pH4.5酸度、至少可利用11种碳源、接种2h后均能迅速产酸的优质乳酸菌;基因鉴定表明它们分属于粪肠球菌（Enterococcus faecalis）（S1、S2、S5和S6菌株）、人参土芽孢杆菌（Weizmannia ginsengisoli）（S3菌株）和戊糖片球菌（Pediococcus pentosaceus）（S4与S7菌株）3个菌种。试验3乳酸菌对柱花草青贮品质和微生物群落的影响 以柱花草为原料，将从试验二筛选出来的乳酸菌添加到柱花草中青贮，试验设置对照组（CK组）、粪肠球菌组（S1）、戊糖片球菌组（S4）、植物乳杆菌组（LP）、粪肠球菌和植物乳杆菌混合接种组（S1+LP），戊糖片球菌和植物乳杆菌混合接种组（S4+LP）,在青贮第1d，3d,7d,14d,30d和60d测定其发酵品质、营养成分和微生物群落。结果表明，添加乳酸菌可以显著提高柱花草青贮饲料干物质含量并降低青贮饲料的pH值、乙酸和氨态氮含量（P＜0.05）;耐高温乳酸菌S4的接种使蛋白含量降低，但与LP进行混合接种后，蛋白质的分解被抑制;S1+LP组的乳酸含量显著高于其余试验组（P＜0.05）。综上所述，将乳酸菌S1和LP混合接种可有效提高柱花草青贮饲料发酵品质并且保留更多的营养成分。
NETL