摘要
目的：药用植物内生真菌次生代谢产物结构新颖，活性多样，是药物先导化合物的理想来源。但在常规实验条件下，真菌大部分的次生代谢物生物合成基因簇处于沉默状态或表达水平较低。通过化学表观遗传修饰对真核生物染色质进行转录前修饰，可有效激活真菌沉默次生代谢产物基因，是挖掘内生真菌次生代谢潜能的有效途径。 方法：本文第一章和第二章使用化学表观遗传修饰剂（组蛋白去乙酰化酶抑制剂：SAHA及DNA甲基化酶抑制剂：5-Aza C）对内生真菌KMU 18029和KMU 18024进行表观遗传修饰，对菌株培养体系进行发酵条件优化，筛选出菌株适宜的化学表观遗传修饰条件。随后以筛选出的最优条件进行大规模发酵，从其次级代谢物中获取新化合物，并对化合物进行活性测试。第三章对内生真菌KMU 22001次级代谢物进行分离鉴定及活性研究。 结果：本文共分离鉴定54个化合物，不重复化合物47个，包括5个新化合物和1个首次确定绝对构型的化合物。化合物的结构类型主要涉及杂萜类、聚酮类、甾醇类等。对化合物进行细胞毒活性、抗乙酰胆碱酯酶活性、NO抑制活性和抗菌活性测试，从中发现部分活性较好的化合物。 1. 通过使用SAHA和5-Aza对短柄乌头内生真菌Penicillium sp. KMU 18029进行化学表观遗传修饰，从其次级代谢物中分离鉴定出 5 个新化合物pyrandecarurins A ， pyrandecarurins B ， pileotin B ， geranylgeranyl-HPPO 和(3R,4S)-3,4,8-trihydroxy-6-methyl-3,4-dihydronaphthalen-1(2H)-one ，并通过 ECD计算首次确定了 pileotin A 的绝对构型；2. 从黄草乌内生真菌 Talaromyces variabilis KMU 18024中分离到该属真菌的特征次级代谢物，azaphilones衍生物；3. 从云南翠雀内生真菌Stachybotryaceae KMU 22001中分离出15个已知化合物，包括三个bisabosquals类化合物，该类化合物可作为KMU 22001化学分类鉴定依据。 结论：以化学表观遗传修饰为手段，对云南药用植物内生真菌进行代谢潜力挖掘，成功从其发酵粗提物中分离鉴定出新结构的活性次生代谢产物。该研究为化学表观遗传修饰剂调控真菌次级代谢物研究提供了理论依据和数据支撑。
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