摘要
本研究旨在筛选产酸高且耐单宁（Tannins,TA）的乳酸菌菌株并将其与单宁组合添加到青贮饲料中以提高发酵品质、减少蛋白降解。从单宁含量较高的植物青贮饲料中分离纯化乳酸菌，筛选出产酸高且单宁耐受性强的菌株。将筛选到的4株植物乳杆菌（Lactobacillus plantarum,LP）添加到柱花草（Stylosanthes guianensis Sw.）和全株大豆中进行青贮发酵试验，研究其和单宁组合添加对青贮发酵品质和蛋白组分的影响，进一步筛选优质菌株。将保存蛋白效果最好的1株植物乳杆菌和单宁组合添加到柱花草中进行青贮试验，研究发酵品质、蛋白组分和微生物多样性的动态变化，从而进一步明确其和单宁组合添加对青贮柱花草的发酵品质和蛋白保存的改善效果，为减少青贮饲料蛋白降解和相关青贮添加剂的研究提供理论依据。 本实验从不同青贮材料中分离纯化了共264株菌，从中选取了29株产酸高的菌株，经16S rDNA鉴定结果表明均为植物乳杆菌。将这29株植物乳杆菌进行耐单宁测试后选取了4株耐受程度较强的乳酸菌。将上述4株菌单独或与单宁组合添加到柱花草和全株大豆中进行青贮试验，研究结果表明，和对照组相比，处理组的pH值、非蛋白氮（Nonprotein-Nitrogen,NPN）和氨态氮（Ammonia-Nitrogen,NH3-N）的含量均显著下降（Plt;0.05），真蛋白（True protein,TP）含量显著增加（Plt;0.05）（除全株大豆青贮中单独添加乳酸菌的处理组以外）。体外消化试验结果表明LP4+2%TA处理组的72h体外产气量高于其他处理组，柱花草青贮试验中LP4+2%TA处理组的干物质消化率高于其他处理组。综上所述，组合添加乳酸菌和单宁可有效改善柱花草和全株大豆的发酵品质、蛋白质保存率和动物消化率，其中LP4的效果最好。 将LP4单独或与单宁组合添加到柱花草中，在青贮发酵的第3、7、14、31d开袋取样测定柱花草的发酵品质、蛋白组分和微生物多样性。研究结果表明组合添加乳酸菌和单宁显著降低了柱花草的pH值、大肠杆菌数量、非蛋白氮和氨态氮含量（Plt;0.05），显著增加了真蛋白含量（Plt;0.05），有效改善了柱花草青贮的发酵品质和蛋白质保存率。组合添加乳酸菌和单宁降低了变形菌门（Proteobacteria）、蓝藻门（Cyanobacteria）、放线菌门（Actinobacteria）、肠杆菌属（Enterobacter）、乳球菌属（Lactococcus）、甲基杆菌属（Methylobacterium）、片球菌属（Pediococcus）和微杆菌属（Microbacterium）的相对丰度，增加了厚壁菌门（Firmicutes）、乳杆菌属（Lactobacillus）的相对丰度。综上所述，组合添加耐单宁乳酸菌和单宁改变了微生物菌群结构，有效改善了柱花草青贮发酵品质，减少了蛋白质降解。
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