摘要
附子为毛茛科植物乌头子根Aconitum carmichaeli Debx的加工品，是一种具有悠久的药用历史的中药材，具有显著的回阳救逆、祛风除湿、消炎止痛等功效。附子中的单酯型生物碱和双酯型生物碱是发挥药效的主要成分，其中双酯型生物碱具有心脏和神经毒性，使用不当容易引起中毒，因此，附子的炮制减毒是学者们研究的热点。而淀粉作为附子中含量丰富的一部分，常在生物碱等有效成分被提取后直接废弃，鲜有研究。随着我国食品和医药工业的快速发展，对中药淀粉的深入研究对中药资源的合理化利用有着重大意义。本研究以生附子为原料，通过乳酸芽孢杆菌（Bacillus sp.）DU-106发酵，探究微生物发酵炮制过程对附子生物碱的含量的影响；进而探究乳酸芽孢杆菌对附子淀粉结构、理化性质及其与生物碱互作的影响。本文的研究成果和结论有： （1）利用乳酸芽孢杆菌DU-106发酵生附子，探究其对单、双酯型生物碱的含量和种类的影响。附子经炮制后，毒性成分单、双酯型生物碱均有所降低，双酯型生物碱的含量主要呈现先显著减小后缓慢增加的趋势。经过发酵炮制，附子中的强毒性成分-双酯型生物碱在第15天下降82.7%，达到药典炮制标准。结果表明乳酸杆芽孢杆菌发酵炮制对附子有明显的减毒作用。 （2）以生附子、传统蒸制附子为对照，研究乳酸芽孢杆菌DU-106发酵对淀粉结构特性的影响。基础理化性质结果表明，蒸制淀粉的水结合能力较生淀粉提高63.14±0.9%，透明度较生淀粉降低11.84±0.8%；发酵淀粉水结合能力与生淀粉无显著差异，透明度较生淀粉降低了7.34±0.3%。结构特性结果显示：发酵淀粉与生淀粉的红外吸收光谱基本相同，而蒸制淀粉的红外吸收光谱与其他两者的吸收峰强度存在差异；结晶性能方面，与生淀粉相比，发酵淀粉和蒸制淀粉的结晶度有所下降，蒸制淀粉的结晶度下降较为明显。生淀粉和发酵淀粉的颗粒形貌显示，表面较光滑，圆球状、不规则多角形、粒径约30-50μm；经高温蒸制炮制后，淀粉的表面较不光滑，粒径变小。不同炮制处理对附子淀粉稳态流变显示，炮制处理前后附子淀粉均呈现剪切稀化的现象。在动态流变测定中发现，所有附子淀粉样品的储能模量（G′）都大于损耗模量（G″），蒸制处理后附子淀粉的储能模量（G′）和损耗模量（G″）明显低于生附子和发酵附子，蒸制附子淀粉糊的凝胶强度减弱。 （3）对不同炮制方式的附子总生物碱和附子淀粉，进行不同比例的热混合，结果表明生物碱与淀粉存在非共价键作用，高浓度的生物碱可以影响附子淀粉的流变特性，而表观形态显示不同浓度生物碱与不同炮制方法处理后的附子淀粉所产生的分子作用力的不同，影响了附子淀粉体系中颗粒溶胀度，改变了淀粉分子间的相互作用和结构有序化程度。而不同炮制方式处理后的六种生物碱含量溶出情况显示出，淀粉类成分不仅能够影响附子生物碱的溶出，还能与生物碱发生一定形式的结合，影响其含量以及在水溶液中的存在形式。 综上，本研究通过对微生物发酵附子降低了附子的毒性，并对发酵炮制与传统蒸制附子淀粉、生附子淀粉的理化性质进行对比研究，进而对比附子总生物碱对附子淀粉的结构及其流变学性质的影响和附子淀粉对生物碱溶出变化的影响两方面来阐明两者之间可能存在的相互作用关系，为附子的进一步产业化提供理论依据。
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