摘要
糖尿病是全球排名第一的慢性疾病，可引发多种严重的并发症，其中2型糖尿病（Type2diabetes，T2DM）发病隐匿，是临床上主要的发病类型，占成年人糖尿病患者90%以上。随着宠物市场的发展，糖尿病也成为了伴侣动物犬、猫最常见的内分泌疾病之一，严重影响动物的生命安全和生活质量。目前，T2DM没有根治的办法，临床治疗方法存在功效不足或严重的不良反应，开发新型治疗药物研究具有重大意义。本研究通过改良合成一种新型合成药物荧光团-达格列净二联体（DX-B-DA，Dyad），增强药物在病变区域的富集作用，通过动物模型临床表现、病理变化相关指标，结合转录组生物信息学分析，对其治疗效果进行研究和评价，探究其作为T2DM治疗药物的可行性，为临床上宠物T2DM的治疗提供参考。 本研究使用高脂饲料（High-fatdiet，HFD）诱导饲养后，注射低剂量链脲佐菌素（Streptozotocin，STZ）制备T2DM模型，通过空腹血糖、口服糖耐量测试（OGTT）和临床症状对模型进行评价。选用80只C57BL/6J小鼠，随机分为对照组、T2DM组、Dyad治疗组、二甲双胍治疗组，连续给药6周后，检测肝肾功能生化指标，进行活体成像和肾脏病理组织学观察。通过肾脏转录组测序，筛选差异表达基因，进行GO功能和KEGG富集分析。结果表明：（1）通过连续喂养9周HFD组OGTT出现胰岛素抵抗，HFD组注射低剂量STZ，小鼠连续5周空腹血糖平均值＞11.1mmol/L，表明造模成功。（2）与T2DM小鼠相比，经过Dyad治疗后小鼠空腹血糖明显下降（P＜0.001）、生化指标（ALT、AST、Crea、UREA）显著下调（P＜0.01），OGTT恢复至与对照组水平相似，体重减轻；活体成像显示治疗后小鼠肝脏、肾脏损伤的荧光信号减少；病理切片可见T2DM小鼠表现明显的肾小球体积增大，肾小球基底膜增厚，出现典型的肾性病变特征，而Dyad组小鼠肾小管上皮细胞仅有少量的空泡变性，肾小球结构趋于正常。表明Dyad对T2DM小鼠具有显著的治疗效果。（3）转录组测序结果中，T2DM组和对照组有7168个差异基因，3614个上调和3554个下调，Dyad组与对照组有932个差异基因，478个上调，454个下调，经治疗差异表达基因减少约87%。通过KEGG富集分析发现，相较于对照组，T2DM的NOD样受体、NF-κB通路激活，抑制丙酮酸、柠檬酸循环、氧化磷酸化代谢，Dyad可以纠正T2DM代谢紊乱，同时可以通过激活溶酶体通路，抑制TNF-α和NF-κB通路减缓或治疗T2DM。 以上结果表明，新型合成药物Dyad可以为T2DM早期的肝肾损伤提供可视化诊断，并在治疗T2DM方面具有显著的疗效，可为T2DM预后评估和治疗靶点提供参考。
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