摘要
目的:本文探讨PDCD5在肾透明细胞癌发生发展中的作用以及相关机制，旨在改善肾透明细胞癌患者预后，为寻求有效的治疗方案和靶点提供依据。 研究方法:本实验以769P和786-O这两种肾透明细胞癌细胞系为研究对象。 1.基于TCGA和GEPIA2数据库，通过生物信息学分析，预测PDCD5在肾透明细胞癌肿瘤组织表达高于正常癌旁组织，且PDCD5高表达与癌症不良预后相关。通过免疫组化实验检测PDCD5在肾透明细胞癌组织和正常癌旁组织的表达差异。 2.通过划痕和Transwell实验评估敲低PDCD5蛋白后肾癌细胞迁移和侵袭能力变化，并对结果进行统计学分析。WesternBlot试验检测敲低PDCD5蛋白后上皮间充质转化相关蛋白表达变化。 3.通过GEPIA2数据库筛选与PDCD5相关系数最高的前1000个基因，并在Metascape数据库中进行GO富集分析，结果预测PDCD5在肾透明细胞癌中与细胞周期相关。CCK-8和EDU实验检测敲低PDCD5后细胞增殖速率变化。流式细胞术检测敲低PDCD5后细胞周期时相G1，G2和S期变化并对结果进行统计学分析。GEPIA2数据库预测与PDCD5相关的细胞周期蛋白并通过WesternBlot实验加以验证。 结果: 1.生物信息学分析结果表明与正常组织相比，PDCD5在肾透明细胞癌肿瘤组织中高表达;PDCD5高表达与低总生存率，低无病生存率和高肿瘤分期相关;单因素回归分析和多因素回归分析结果证明PDCD5与肾透明细胞癌不良预后正相关并且可以作为一个独立的预后因子。免疫组化实验结果表明PDCD5在肾透明细胞癌肿瘤组织的表达高于正常组织。 2.划痕和Transwell实验结果表明敲低PDCD5后，肾透明细胞癌细胞迁移和侵袭能力降低。WesternBlot结果显示敲低PDCD5后，与对照组相比，E-Cadherin蛋白表达升高，N-Cadherin和Vimentin蛋白表达降低，表明肾透明细胞癌细胞系上皮间充质转化被抑制。 3.GO富集分析结果预测PDCD5蛋白在肾透明细胞癌中参与细胞周期信号通路。CCK-8和EDU结果显示PDCD5低表达条件下细胞增殖被抑制。细胞流式结果显示敲低PDCD5蛋白后，769P细胞系G1期比例下降，G2和S期的比例上升;786-O细胞系G1期比例下降，S期比例上升。生物信息学分析预测PDCD5与CDK1、CCNB和CCNA2相关性最高且呈正相关;WesternBlot实验证明敲低PDCD5蛋白后，CDK1、CCNB和CCNA2蛋白表达降低。 结论: 1.PDCD5在肾透明细胞癌组织中高表达。 2.PDCD5高表达与不良预后相关。 3.PDCD5低表达通过抑制上皮间充质转化，继而抑制肾透明细胞癌细胞的迁移和侵袭。 4.PDCD5低表达抑制细胞增殖，降低G1期时相比例，增加S期和G2期时相比例。 5.PDCD5低表达通过调控细胞周期蛋白激酶CDK1和周期蛋白CCNB、CCNA2抑制细胞周期。
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