摘要
目的: CD177是一种糖磷脂酰肌醇连接的胞外膜结合蛋白，主要在中性粒细胞及其前体细胞表达，少部分在某些上皮细胞和肿瘤浸润调节性 T 细胞(tumor infiltrating regulatory T cells,TI Tregs)上表达。CD177能通过促进中性粒细胞与内皮细胞的相互作用、影响中性粒细胞胞外诱捕网(neutrophil extracellular traps，NETs)的生成、介导TI Treg细胞的活性等，参与不同的生理病理过程。本研究分析了中性粒细胞上膜结合型CD177在系统性红斑狼疮(systemic lupus erythematosus,SLE)患者组和正常对照组之间、SLE活动组与非活动组之间的表达差异，以及与SLE患者病情活动度的关系，以明确CD177是否影响SLE的发生发展。同时分析了 SLE患者CD177与NETs水平的相关性，初步探索CD177是否通过影响NETs的形成参与SLE的发病过程。 方法: 1.收集46例SLE患者，排除肿瘤、骨髓增生异常综合征、血管炎、真红细胞增多症、高血压、糖尿病等疾病。同时收集35例健康体检者作为正常对照组，采集新鲜外周血，EDTA抗凝，用流式细胞术(flow cytometry,FCM)检测中性粒细胞上膜结合型CD177表达阳性率(％)及单个细胞平均荧光强度(mean fluorescent intensity，MFI),统计分析二者在SLE患者和正常对照组之间的差异。 2.将SLE患者根据疾病活动度评分(systemic lupus erythematosus disease activity index,SLEDAI)分为活动组(＞4 分)23 例与非活动组(≤4)23例，统计分析中性粒细胞上膜结合型CD177表达阳性率(％)及MFI在两组之间的差异。 3.收集SLE患者抗双链DNA抗体、血沉、全血超敏C反应蛋白、C3、C4、血浆肌酐、尿白蛋白/肌酐比值、尿总蛋白/肌酐比值等实验室数据，分析SLE患者中性粒细胞上膜结合型CD 177表达阳性率(％)及MFI分别与上述实验室指标的相关性。 4.采用受试者工作特征曲线(receiver operating characteristic curve,ROC),简称ROC曲线，分析中性粒细胞上膜结合型CD 177表达率和表达量对SLE患者组和正常对照组以及SLE活动组和非活动组的鉴别诊断效能。并与SLE成熟实验室诊断指标抗双链DNA抗体对SLE活动组和非活动组的鉴别诊断效能进行比较。 5.采集SLE患者组和正常对照组空腹静脉血，EDTA抗凝，分离血浆-20℃冻存备用。通过ELISA检测血浆中NETs产物弹性蛋白酶(neutrophil elastase,NE)水平，分析SLE患者中性粒细胞上膜结合型CD177表达阳性率(％)及MFI分别与NE的相关性。 结果: 1.SLE患者中性粒细胞上膜结合型CD177表达阳性率(％)为[82.85(74.63,90.61)],较正常对照组[67.61(58.17,78.19)]显著升高(p＜0.001);SLE患者中性粒细胞上膜结合型CD177 MFI为[98146.75(77687.33,154814.75)],较正常对照组[75449.9(62840.9,91193.55)]显著升高(p＜0.01)。 2.SLE活动组中性粒细胞上膜结合型CD177表达阳性率(％)为[87.48(78.86,94.27)],较非活动组[80.42(69.62,87.30)] 显著升高(p＜0.05)，较正常对照组[67.61(74.63,90.61)]也显著升高(p＜0.001);SLE活动组中性粒细胞上膜结合型CD177 MFI为[140233.2(99572.95,182628.7)]，较非活动组[83803.9(66349.1,98146.75)]和正常对照组[75449.9(77687.33,154814.75)]显著升高(p＜0.001)。SLE 非活动组中性粒细胞上膜结合型CD 177表达阳性率(％)[80.42(69.62,87.30)]较正常对照组[67.61(58.17,78.19)]显著升高(p＜0.05);SLE非活动组中性粒细胞上膜结合型CD 177 MFI为[83803.9(66349.1,98146.75)],较正常对照组[75449.9(77687.33,154814.75)]无显著差异(p＞0.05)。 3.SLE患者中性粒细胞上膜结合型CD 177 MFI与尿白蛋白/肌酐比值(r=0.4017,p=0.0419)正相关，与抗双链DNA抗体、血沉、全血超敏C反应蛋白、C3、C4、血浆肌酐、尿白蛋白/肌酐比值无相关性。SLE患者中性粒细胞上膜结合型CD177表达阳性率(％)与上述指标均无相关性。 4.分析SLE患者抗双链DNA抗体、血沉、全血超敏C反应蛋白、血浆肌酐、尿白蛋白/肌酐比值、尿总蛋白/肌酐比值正常组和增高组之间及C3、C4正常组和降低组之间中性粒细胞上膜结合型CD 177表达阳性率(％)及MFI的差异，结果表明仅CD 177 MFI在尿白蛋白/肌酐比值增高组(150526.57±92366.20)与正常组(94937.63±38140.16)之间有显著差异(p＜0.05),其余指标增高组与正常组、降低组与正常组之间均无统计学差异(p＞0.05)。 5.ROC曲线分析中性粒细胞上膜结合型CD177表达阳性率(％)对SLE和正常对照的鉴别诊断效能，计算出曲线下面积(area under curve，AUC)为0.7481,选择最佳截点得到cut-off值为79.32％,对应的敏感性为0.6304,特异性为0.7714,Youden指数为0.4018;ROC曲线评价中性粒细胞上膜结合型CD177 MFI对SLE和正常对照的鉴别诊断效能，AUC为0.6994,选择最佳截点得到cut-off值为91872,对应的敏感性为0.6522,特异性为0.7714,Youden指数为0.4236。ROC曲线分析中性粒细胞上膜结合型CD177表达阳性率（％）对SLE活动期和非活动期的鉴别诊断效能，计算出AUC为0.6938，选择最佳截点得到cut-off值为89.57％,对应的敏感性为0.4783,特异性为0.8696,Youden指数为0.3479;ROC曲线评价中性粒细胞上膜结合型CD177 MFI对SLE活动期和非活动期的鉴别诊断效能，计算出AUC为0.7977,选择最佳截点得到cut-off值为95399,对应的敏感性为0.8696,特异性为0.6957,Youden指数为0.5653。ROC曲线评价血清抗双链DNA抗体对SLE活动期和非活动期的鉴别诊断效能，计算出AUC为0.6908,选择最佳截点得到cut-off值为9.595,对应的敏感性为0.6875，特异性为0.7368,Youden指数为0.4243。CD177阳性表达率和MFI对SLE活动期和非活动期的鉴别诊断效能优于抗双链DNA抗体。 6.SLE患者中性粒细胞上膜结合型CD177 MFI与NE水平（r=0.4320,p=0.0027）正相关，中性粒细胞上膜结合型CD177表达阳性率（％）与NE水平无相关性。 结论: 1.中性粒细胞上膜结合型CD177可能与SLE的发生发展有关，并可能成为评判疾病活动度和肾脏损伤程度的实验室指标。 2.CD177可能通过影响NETs的产生参与SLE的病理过程。
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