摘要
目的:儿茶酚胺敏感性多形性室性心动过速（CPVT）是一种恶性遗传性心律失常疾病，多发生于无器质性心脏病的青少年。β受体阻滞剂是其首选治疗，但仍有约1/3患者疗效不佳。近年，氟卡尼对CPVT的治疗作用得到逐步认识，但其阻滞峰钠电流后同样具有致心律失常风险。不以钠通道为靶点的Na+稳态干预策略或许是CPVT治疗的新方向。钠葡萄糖共转运体2（SGLT2）抑制剂是心力衰竭（心衰）治疗的新兴药物，既往研究提示心肌细胞内的Na+与Ca2+稳态或许是SGLT2抑制剂治疗心衰的潜在靶点。本研究首先明确恩格列净对心室肌细胞内Na+/Ca2+紊乱的调控作用，进一步探索恩格列净对CPVT的保护效应。 方法:急性分离野生型小鼠心脏，取其心室肌细胞予以哇巴因孵育，以此建立Na+超载的细胞模型。利用IonOptix系统以及共聚焦显微镜观察恩格列净对Na+及Ca2+的调控作用。随后，观察恩格列净对不同浓度哇巴因所致细胞内Na+超载的影响。另一部分以CPVT的CASQ2R33Q转基因小鼠为研究对象，观察恩格列净灌胃前后小鼠的心律失常诱发情况。同时，检测恩格列净对R33Q小鼠心室肌内离子稳态的影响。 结果:在正常心室肌细胞中，1μmol/L恩格列净未能对Na+与Ca2+循环产生影响。而经50μmol/L哇巴因预处理后，心室肌细胞内Na+水平升高34％，同时伴随着Ca2+循环紊乱（Ca2+瞬变、肌浆网Ca2+库及自发性Ca2+波均显著增加）。上述由哇巴因诱导的离子稳态失衡可在10分钟内由1μmol/L恩格列净所纠正。随着哇巴因浓度的提升（10-50-100μmol/L）,恩格列净降低心室肌细胞内Na+负荷的能力也逐步增强，而在经钠氢交换体（NHE）抑制剂Cariporide（1μmol/L）预处理后，恩格列净的上述药理效应被抵消。另一方面，在整体水平，提前2小时予以恩格列净处理可有效控制R33Q小鼠室性心动过速发作(100％vs.0％,P＜0.05,n=4)。在细胞层面，恩格列净能够改善自发性Ca2+波，并且减少Ca2+火花的频率(19.1±0.9vs.9.6±1.4,P＜0.01,n=4)与幅值(1.03±0.29vs.0.82±0.26,P=0.01,n=4),从而抑制延迟后除极所致触发活动。此外，恩格列净可降低R33Q小鼠心室肌内16％Na+，其降Na+效应发挥迅速，并且在10分中内逐渐达到平衡。 结论:恩格列净能够有效降低哇巴因诱导的心室肌细胞Na+与Ca2+超载，该效应呈Na+依赖性。其中，NHE或许是恩格列净的潜在作用靶点。同时,恩格列净能够有效控制R33Q小鼠室性心动过速的发作，这可能与其降低细胞内Na+,并且稳定细胞内Ca2+循环从而抑制触发活动相关。
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