摘要
目的:建立F-circP3F过表达/沉默横纹肌肉瘤(RMS)裸鼠移植瘤模型,并初步探讨其体内生物学功能。 方法:(1)通过慢病毒转染F-circP3F过表达/沉默质粒构建RMS稳转细胞系;(2)通过裸鼠皮下注射建立F-circP3F过表达/沉默RMS裸鼠移植瘤模型;(3)运用常规HE染色和免疫组化进行RMS移植瘤形态与免疫表型观察;(4)应用PCR及FISH技术检测移植瘤中PAX3-FOXO1和F-circP3F mRNA的表达;(5)应用qPCR检测F-circP3F过表达/沉默RMS移植瘤的增殖、凋亡、肌分化等相关分子的变化;(6)采用GraphPad Prism7和SPSS22.0软件进行数据分析。 结果:(1)成功建立F-circP3F过表达的胚胎型RMS裸鼠移植瘤模型和F-circP3F沉默的腺泡状RMS裸鼠移植瘤模型;(2)F-circP3F过表达的胚胎型RMS移植瘤瘤体生长速度增快、体积增大,但差异没有统计学意义;(3)F-circP3F沉默的腺泡状RMS移植瘤成瘤时间延长、瘤体生长速度减慢、体积缩小;(4)F-circP3F过表达/沉默RMS裸鼠移植瘤组织学表现为横纹肌肉瘤的形态学特征,并呈现RMS的免疫表型(Desmin+和MyoD1+);(5)F-circP3F过表达可在体内促进RMS细胞的增殖、抑制肌分化;(6)沉默F-circP3F可在体内抑制RMS细胞的增殖、促进肌分化。 结论:(1)成功建立了F-circP3F过表达/沉默的RMS裸鼠移植瘤模型;(2)初步研究表明,F-circP3F在体内可以促进RMS生长、抑制其肌分化。