摘要
小麦茎基腐病(Fusarium crown rot,FCR)严重影响小麦的产量与品质,种植抗病品种是防治该病害最经济有效、绿色环保的措施,然而,目前生产上种植的小麦品种普遍高感。抗茎基腐病小麦种质资源缺乏、重要抗病基因不明确是制约小麦茎基腐病抗性改良进程的关键问题。本研究以黄淮麦区小麦茎基腐病的优势病原菌假禾谷镰刀菌(Fusarium pseudograminearum)菌株 WZ-8A为致病菌,采用病小米粒接种法对周麦 22的 1196个高世代EMS诱变系进行苗期茎基腐病抗性接种鉴定,筛选到中抗茎基腐病突变体fcrZ22。以周麦 22 为母本、fcrZ22 为父本构建了 F2群体,从中挑选极端抗、感单株构建混池,进行集群分离分析(Bulked segregant analysis, BSA),检测茎基腐病抗性位点;进而对 F2∶3 群体进行苗期茎基腐病抗性接种鉴定,并利用根据茎基腐病关联 SNP 信息开发的 dCAPS 标记检测 F2群体、构建遗传连锁图,定位抗茎基腐病 QTL(Quantitative trait loci)并对其抗病效应进行分析。主要研究结果如下: 1. 周麦22突变体库的抗性鉴定:分别于 2021年 12月、2022年1月与3月在人工气候室进行鉴定,3 次试验的病情指数显著相关(P <0.01)。野生型周麦 22 的病情指数在42.6~52.3 之间变动、表现为高感, 1196 个诱变系的病情指数在 16.4~90.1 之间变动,无免疫与高抗材料,表现中抗的有 2 个,仅为供试材料的 0.2%,而中感与高感的分别占 0.9%与 98.9%,两个中抗材料中以 22M0306的病情指数较低,在所有鉴定试验中均稳定的表现中抗,命名为fcrZ22。 2. F2群体的遗传分析与 BSA:根据周麦 22/fcrZ22 的 F2群体的病情指数,利用‘数量性状主基因+多基因混合遗传模型’进行遗传分析的结果显示,该群体中茎基腐病抗性符合‘2个具加性-显性-上位效应的主基因+具加性-显性效应的多基因’遗传模型;从F2群体中挑选 20 个病情指数最低的单株构建抗池、20 个病情指数最高的单株构建感池,加上双亲共 4个样品,结合 660K SNP芯片进行 BSA分析,共检测到 1797个茎基腐病关联 SNPs,主要分布在 9 条染色体上,分别是 4A(379)、3A(240)、7B(224)、2A(198)、5A (182)、7A(176)、3B(174)、1B(98)和1D(27)染色体,表明这些染色体上可能存在重要的抗茎基腐病QTL。 3. QTL定位与效应分析:挑选 9条染色体上 348个关联的 SNPs开发 dCAPS标记,对抗感双亲进行检测后,筛选到 104个多态性标记,利用这些多态性标记对 F2群体进行分子检测,结合 F2∶3群体的茎基腐病抗性接种鉴定结果进行遗传连锁分析,共定位到 4 个小麦苗期茎基腐病抗性相关QTL,位于1B、3A、5A和7B染色体上,分别命名为QCR.hau-1B、QCR.hau-3A、 QCR.hau-5A和 QCR.hau-7B,其中 QCR.hau-1B的表型变异解释率与LOD都最高,分别为 30.1%与 6.3,其抗病基因型源于 fcrZ22,QCR.hau-1B位于标记 CR-1B-7与CR-1B-8之间 9.1 cM区间,在中国春 1B染色体物理图谱上位于 674.0~676.1 Mb之间,该区域未见抗茎基腐病 QTL 报道,是 1 个新的抗茎基腐病 QTL;在定位群体中,4 个 QTL分别将病情指数降低了 39.5%、19.8%、7.9%与 16.2%,携带 QCR.hau-1B纯合株系的病情指数最低(29.1),显著低于未携带 QCR.hau-1B 的纯合株系(P <0.01),其次为QCR.hau-3A(35.1),也显著低于未携带该 QTL 的株系(P <0.05),而携带与未携带QCR.hau-5A和 QCR.hau-7B的株系间病情指数差异不显著(P <0.05)。 本研究连续两年对周麦 22 的高世代 EMS 突变体库进行 F. pseudograminearum 茎基腐病抗性接种鉴定,筛选到苗期中抗茎基腐病突变体 fcrz22,进而构建遗传群体定位到抗茎基腐病主效 QTL QCR.hau-1B。fcrz22 为小麦茎基腐病抗性改良提供了优异种质资源, QCR.hau-1B 的初定位为其精细定位、发掘茎基腐病抗性基因奠定了研究基础,有助于推进抗茎基腐病小麦新品种的培育进程,对保障国家粮食安全和保护人民生命健康具有重要意义。