摘要
目的:（1）调研中药材续断受真菌毒素污染情况;（2）鉴定续断中的产毒真菌，明确续断受真菌毒素污染的原因;（3）分析黄曲霉菌对续断品质及药效的影响，评估续断中黄曲霉毒素的暴露风险。 方法:（1）运用超高液相色谱串联质谱仪器（UPLC-MS/MS），建立续断中8种真菌毒素的同步检测方法。（2）对45批续断药材样本进行检测，分析续断药材中真菌毒素的种类、污染水平。（3）从受污染续断样本中分离、纯化、鉴定产毒真菌，明确续断中真菌毒素的来源。（4）比较“发汗”续断和未“发汗”续断中产毒真菌的种类及丰度的变化，阐明“发汗”过程对产毒真菌的影响。（5）制备黄曲霉菌污染的续断样本，评价染菌前后续断总皂苷和川续断皂苷Ⅵ的变化，并比较染菌续断与正常续断在抗骨质疏松疗效上的差异，揭示黄曲霉菌对续断药材品质的影响。（6）计算染菌续断煎煮后黄曲霉毒素B1的迁移率，结合污染数据建立基于Monte Carlo模拟法的概率评估模型，利用暴露限值法进行健康风险评估。（7）分析染菌续断对骨质疏松小鼠肝脏、肾脏的影响，描述染菌续断的暴露危害。 结果:（1）建立了续断中8种真菌毒素（黄曲霉毒素B1、B2、G1、G2,赭曲霉毒素A，玉米赤霉烯酮，T-2毒素和杂色曲霉毒素）的同步检测方法。（2）在45批续断药材中，真菌毒素检出率为48.89％,真菌毒素类型主要为AFB1、AFG1和OTA毒素，检出率分别为:35.56％、22.22％和15.56％，平均污染水平分别为5.25 μg·kg-1、9.14 μg·kg-1和13.58 μg·kg-1。（3）从续断样本中鉴定出产毒真菌 Aspergillus flavus、Aspergillus westerdijkiae、Fusarium oxysporum 和 Fusarium graminearum,分别产生 AFB1、OTA、ZEN 和 T-2 毒素。（4）“发汗”续断和未“发汗”续断中产毒真菌种类基本一致，但相对丰度存在一定差异。（5）黄曲霉菌接种续断后，药材中总皂苷的含量和川续断皂苷Ⅵ含量分别下降了 20.97％和23.23％，并影响了其对骨质疏松模型小鼠的治疗效果。（6）染菌续断经煎煮后，约有16.04％的AFB1迁移至汤液中，暴露风险评估结果表明续断汤液中黄曲霉毒素B1平均摄入和高摄入的MOE值（95％置信区间）分别为7727.28～3541.67和1404.95～646.39。（7）染菌续断的煎煮液干预骨质疏松小鼠能诱导肝肾组织出现病理损伤。 结论:(1)续断药材受真菌毒素污染现象较为普遍，污染水平较高，联合污染的现象较为突出。(2)续断中的主要产毒真菌为Aspergillus flavus、Aspergillus westerdijkiae、Fusarium oxysporum 和 Fusarium graminearum，“发汗”过程会增加产毒真菌的丰度。(3)染菌续断中的有效成分显著降低，在一定程度上会影响续断药材的品质和疗效。(4)染菌续断煎煮后，真菌毒素会向汤液中迁移;风险评估显示平均及以上摄入续断中AFB1的人群存在健康风险;染菌续断干预骨质疏松小鼠会造成肝肾毒性。
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