摘要
目的:改善牙髓炎症微环境，促进牙髓-牙本质复合体再生，是活髓保存治疗的关键。以往研究发现，抗坏血酸可调节机体免疫反应并促进组织矿化，但关于抗坏血酸在牙髓炎症微环境中的作用尚不清楚。本研究以脂多糖(Lipopolysaccharides,LPS)诱导人牙髓细胞炎症微环境，同时制备大鼠牙髓炎症模型，探讨抗坏血酸在炎症微环境中对牙髓细胞产生炎性细胞因子的影响及对牙髓炎症病理进程的影响。 方法:体外分离培养健康的人牙髓细胞(Humandentalpulpcells,HDPCs)以1μg/mLLPS诱导炎症微环境。加入50μM抗坏血酸，应用MTT法检测抗坏血酸对人牙髓细胞增殖的影响;应用碱磷酶活性检测及茜素红染色方法检测抗坏血酸对人牙髓细胞成牙/成骨能力的影响;应用ELISA检测抗坏血酸对白介素-6(Interleukin-6,IL-6)、白介素-8(Interleukin-8,IL-8)和白介素-10(Interleukin-10,IL-10)的影响。选取大鼠上颌第一磨牙，人工穿髓，使用饱蘸1mg/mLLPS的无菌棉球涂擦穿髓孔5分钟，建立大鼠牙髓炎症模型。实验组给予50μM抗坏血酸，2天后处死。HE染色观察牙髓组织病理学变化，免疫组化染色比较各组IL-6、IL-8和IL-10的水平。采用SPSS16.0软件，对细胞实验各指标的相对表达量进行独立样本t检验，对动物实验各指标的相对表达量进行单因素方差分析，P＜0.05时有统计学差异。 结果:抗坏血酸对HDPCs的影响与其浓度有关，高浓度(100μM、150μM)抑制HDPCs增殖(p＜0.05),低浓度(50μM)促进HDPCs增殖(p＜0.05），50μM抗坏血酸在LPS诱导的炎症微环境下可显著促进HDPCs增殖并促进其向成牙成骨向分化，炎症早期及时补给抗坏血酸更有利于降低IL-6、IL-8的水平(p＜0.05),增加抗炎细胞因子IL-10的水平(p＜0.01)。大鼠动物实验结果显示早期补给抗坏血酸可缓解牙髓内炎症程度，炎性细胞浸润明显减少。免疫组织化学结果显示50μM抗坏血酸可减少促炎因子IL-6、IL-8的水平，增加抗炎细胞因子IL-10的水平(p＜0.001)。 结论: 50μM抗坏血酸在LPS诱导的炎症微环境下可促进牙髓细胞增殖，促进其向成牙/成骨向分化。早期补给抗坏血酸可减轻牙髓炎症反应，减少促炎细胞因子IL-6、IL-8的水平，增加抗炎细胞因子IL-10的水平，促进机体恢复内稳态。
NETL