摘要
目的：本项目属于国家中药标准化项目“牡丹皮等3种中药饮片标准化建设”的一部分——牡丹皮等3种中药饮片炮制工艺和等级规格质量研究。通过对比研究牡丹皮不同软化方式，优选牡丹皮软化切制工艺参数，进一步规范牡丹皮饮片炮制工艺。建立牡丹皮饮片等级分级方法，制定牡丹皮饮片等级质量标准草案，以便更为全面地控制牡丹皮饮片质量。 方法：建立HPLC法同时测定牡丹皮饮片中没食子酸、芍药苷、1,2,3,4,6-五没食子酰葡萄糖、苯甲酰芍药苷和丹皮酚含量的方法。建立牡丹皮饮片HPLC特征图谱的方法，通过相似度评价，结合聚类分析、主成分分析综合评价不同产地牡丹皮饮片的质量。采用正交法优选牡丹皮趁鲜切制工艺。通过对牡丹皮不同软化方式（闷润法、加热软化法、联合软化法）中丹皮酚含量、浸出物及外观性状的综合评价，优选出牡丹皮最佳炮制工艺方式，采用Box-Behnken响应面法优选牡丹皮软化切制工艺参数，并通过中试生产进行验证。采用响应面-中心复合法优选清炒丹皮工艺技术参数。通过收集不同企业不同等级规格共66批牡丹皮饮片样品，中试生产20批牡丹皮饮片样品，基于2015年版《中国药典》牡丹皮项下相关要求，增加对牡丹皮饮片异形片、二氧化硫含量、农药残留量、重金属含量的检查，结合市场流通情况，评价牡丹皮饮片等级质量标准。 结果：35批不同产地牡丹皮样品中，安徽铜陵产地牡丹皮质量较好。各批次样品相似度在0.936~0.984之间，均＞0.9，相似度良好。通过与对照品进行匹配，共标记7个特征峰，指认出1号峰为没食子酸，2号峰为氧化芍药苷，3号峰为儿茶素，4号峰为芍药苷，5号峰为1,2,3,4,6-五没食子酰葡萄糖，6号峰为苯甲酰芍药苷，7号峰为丹皮酚。并与白鲜皮、赤芍、白芍进行相似性和相关性比对，可有效区分牡丹皮常见混伪品。牡丹皮趁鲜切制工艺参数为：含水量30%，干燥温度40℃，干燥时间为100min，可进一步提高牡丹皮饮片质量。通过对牡丹皮不同软化方式的对比，发现泡法、煮法过程中丹皮酚含量流失严重，且煮法、泡法外观性状不符合2015年版《中国药典》牡丹皮项下对其外观性状描述要求，闷润法制备牡丹皮饮片质量优于其他加工方法。优化的牡丹皮饮片最佳软化切制工艺技术为：将牡丹皮药材洗净闷润，每隔1h喷淋一遍，沥干水，至润透。用弯曲法试验，柔软不易折断为度，约4-5h。40-45℃干燥，过4mm筛除去碎屑杂质等。优选的清炒牡丹皮最佳工艺参数为：炒制温度235℃，炒制时间5min。15家企业不同规格等级共66批牡丹皮饮片中选货片径整体＞10mm，统货片径整体在6-10mm之间。牡丹皮饮片片厚均在3-4mm，部分企业饮片厚度达到5mm。不同厂家选货级饮片中，芍药苷、1,2,3,4,6-五没食子酰葡萄糖、苯甲酰芍药苷、丹皮酚的平均含量分别为0.6460%、0.7350%、0.2477%、1.5523%；不同厂家统货级饮片中，以上4种有效成分的平均含量依次为0.5885%、0.6423%、0.2543%、1.4932%。基于优选的炮制工艺，结合市场流通情况，中试生产两个等级牡丹皮饮片，制定牡丹皮饮片等级质量标准。分级要点如下一等品（选货）牡丹皮饮片异形片不得过5%，丹皮酚含量在1.5%以上；二等品（统货）牡丹皮饮片异形片不得过10%，丹皮酚含量在1.2%以上；一等（选货）、二等（统货）二氧化硫残留量均应不得过150mg·kg-1。其它沿用2015年版《中国药典》牡丹皮项下要求。 结论：HPLC法同时测定多成分以及特征图谱方法重复性好，稳定可靠，为评价牡丹皮饮片质量提供科学依据。验证规范了牡丹皮炮制技术参数。优选的趁鲜切制工艺、炒丹皮工艺稳定可行。建立了牡丹皮饮片等级质量标准评价体系，为牡丹皮饮片等级规格的划分提供依据。
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