摘要
【目的】 1.研究人参皂苷Re、Rf对脓毒症内皮糖萼损伤的保护作用。 2.探究人参皂苷Re、Rf保护内皮糖萼的可能机制。 【方法】 1.动物实验验证人参皂苷Re、Rf对内皮糖萼的影响作用 实验对象为6-8周龄雄性C57BL/6J小鼠，适应性喂养一周后随机分为以下四组：sham组、CLP组、Re+CLP组、Rf+CLP组，每组20只。药物干预组分别给予人参皂苷Re(20mg/kg/d)、人参皂苷Rf(20mg/kg/d)连续灌胃7天，sham及CLP组则给予等体积生理盐水灌胃7天。末次灌胃后1h采用盲肠结扎穿孔（CLP）法建立脓毒症模型，药物干预组于造模后12h给药1次。各组随机选取10只用于观察术后72h生存率，剩余小鼠术后24h取材，测定血浆中炎症因子（TNF-α、IL-1β）及糖萼降解产物（SD-1、HS、HA）浓度，通过伊文思蓝染色实验评估肺血管渗漏情况，通过测定肺干湿比及观察肺组织HE染色病理切片评估急性肺损伤情况。 2.利用网络药理学技术筛选人参皂苷Re、Rf作用于脓毒症血管内皮损伤的潜在靶点及信号通路 通过网络药理学数据库筛选人参皂苷Re、人参皂苷Rf、脓毒症、血管内皮损伤潜在靶点，上述靶点合并去重后获得药物-疾病共同交集靶点，将“人参皂苷Re-脓毒症-血管内皮损伤”“人参皂苷Rf-脓毒症-血管内皮损伤”共同靶点导入数据库并进行网络拓扑分析，构建蛋白相互作用网络并得到作用核心靶点。对交集靶点进行GO及KEGG富集分析，预测人参皂苷Re、Rf治疗脓毒症血管内皮损伤的可能生物学功能及通路。将人参皂苷Re、Rf与各自前5位核心靶点蛋白进行分子对接检验其结合能力。 【结果】 1.动物实验结果表明：人参皂苷Re、Rf具有抗炎作用，能够降低脓毒症小鼠炎症因子TNF-α及IL-1β水平。人参皂苷Re、Rf对内皮糖萼具有保护作用，能够降低脓毒症小鼠糖萼降解产物HS、SD-1浓度，对HA浓度无明显影响。人参皂苷Re、Rf能够降低脓毒症小鼠死亡率。人参皂苷Re、Rf能够改善脓毒症小鼠肺血管渗漏。人参皂苷Rf能够降低脓毒症小鼠肺组织湿干比重，人参皂苷Re对脓毒症小鼠肺湿干比重无明显影响，人参皂苷Re、Rf能够改善脓毒症小鼠肺组织病理损伤。 2.网络药理学筛选得到人参皂苷Re-脓毒症-血管内皮损伤交集靶点59个，人参皂苷Rf-脓毒症-血管内皮损伤交集靶点66个。人参皂苷Re治疗脓毒症血管内皮损伤前5位核心靶点为：TP53、JUN、KRAS、MMP1、CALM3。人参皂苷Rf治疗脓毒症血管内皮损伤前5位核心靶点为：TNF、HSP90AA1、PPARG、NFκB1、CALM3。KEGG富集结果显示人参皂苷Re干预脓毒症血管内皮损伤通路涉及癌症中的蛋白多糖、流体剪切应力与动脉粥样硬化、钙离子信号通路等，人参皂苷Rf治疗脓毒症血管内皮损伤的代表性通路包括癌症中的蛋白多糖、糖尿病并发症中的AGE?RAGE信号通路等。分子对接结果显示人参皂苷Re、Rf与各自前5位靶点均具有良好结合活性。 【结论】 1.人参皂苷Re、Rf对脓毒症内皮糖萼损伤具有保护作用。 2.通过网络药理学分析发现人参皂苷Re保护脓毒症内皮糖萼的机制可能与MMP1、蛋白多糖、流体剪切应力等相关，人参皂苷Rf保护脓毒症内皮糖萼的机制可能与TNF、蛋白多糖等相关。
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