摘要
目的和意义： 本课题旨在利用中药配体和金属离子的协同作用，探讨大黄酸锌金属配合物改善胰岛素抵抗的作用及其机制，为配合物治疗T2DM提供理论基础与现实依据。 方法： 1.物质的合成与表征：通过溶剂热法合成Rh-Zn，并用通过元素分析、质谱、热重分析和红外光谱（EA、MS、TGA和FTIR）等途径进行结构的表征。 2.细胞实验：①通过CellCountingKit-8（CCK-8）法检测大黄酸金属配合物对HepG2、LO2、PC12和H9C2细胞活力的影响。②通过胰岛素浓度和诱导时间的筛选，建立具有最佳效果的胰岛素抵抗模型。通过糖耐量检测试剂盒检测给药前后IR-HepG2细胞的葡萄糖的消耗量来考察药物对细胞胰岛素抵抗是效果。③通过活性氧试剂盒检测给药前后细胞内ROS含量变化以及WB实验中相关蛋白条带（JNK、p-JNK、Pi3k、AKT、p-AKT及GSK-3β）灰度值的变化，研究大黄酸锌金属配合物改善IR-HepG2细胞胰岛素抵抗的作用机制。相关蛋白的表达状况。 3.动物实验：记录HFD/STZ小鼠的体重变化，检测HFD/STZ小鼠的肝糖原、FBG、FINS等含量变化并计算HOMA-IR，检测HFD/STZ小鼠的TG、T-CHO、LDL-C和HDL-C等含量变化，研究Rh-Zn对HFD/STZ小鼠的血糖血脂代谢的影响。 结果： 1.物质的合成与表征：EA、TGA及MS的数据分析结果得出大黄酸与锌的配比为2∶1。在FTIR的实验结果中，金属锌与大黄酸的C=O、α-OH等官能团结合。 2.细胞实验结果：①低浓度大黄酸金属配合物（1μM，10μM）对HepG2、LO2、PC12和H9C2细胞活力的影响不大，高浓度大黄酸金属配合物（100μM,200μM）则会导致HepG2、LO2、PC12和H9C2细胞的存活率下降。②最佳IR模型的条件是胰岛素浓度为1×10-6mol/L，诱导时间为24h。在糖耐量实验测得结果中，与模型组相比，给药后细胞的葡萄糖消耗量显著提高，并且10μM的Rh-Zn的作用效果与阳性药物罗格列酮（Rosi）几乎一致。③Rh-Zn处理后，与模型组相比，IR-HepG2细胞内的ROS水平显著降低。在WB实验的结果中，IR-HepG2细胞经Rh-Zn处理后，AKT蛋白表达上升，JNK、p-JNK、Pi3k、p-AKT和GSK3β蛋白表达下降。 3.动物实验结果：Rh-Zn处理后的HFD/STZ小鼠体重下降，肝糖原、FBG、TG、T-CHO以及LDL-C等含量下降，FINS与HDL-C水平上升。 结论： Rh-Zn能增加细胞对葡萄糖的摄取和利用，改善IR-HepG2细胞的胰岛素抵抗。Rh-Zn改善IR的具体机制可能是：Rh-Zn通过降低IR-HepG2细胞内活性氧ROS的累积从而减轻细胞的氧化应激；Rh-Zn通过上调AKT的蛋白表达，同时下调JNK、p-JNK、Pi3k、p-AKT和GSK3β蛋白表达来影响JNK/Pi3k/AKT/GSK-3β信号通路的转导。Rh-Zn可以改善HFD/STZ小鼠的胰岛素抵抗以及血糖血脂的代谢。
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